基于夹心免疫模型的速测试剂条/盒的研制

来源 :东南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rmprinthecb
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目前快速诊断领域广泛应用的金胶免疫层析试剂条、酶联免疫试剂盒、以及正在迅速发展的生物芯片技术大多数是基于双抗夹心免疫模型研制的,它们都拥有抗原抗体的高特异性和高灵敏度,以及分析方法快速、简单、高通量、低成本等显著优点。为此,本论文就同一夹心免疫模型应用于以上三种分析方法开展了一系列的研究。  本论文采用柠檬酸三钠还原氯金酸的方法制备出颗粒均一、单分散性的金胶(GNPs),基于GNPs对生物大分子的静电吸附作用,将β-HCG(MabⅡ)抗体成功偶联于金胶表面形成GNPs-MabⅡ复合物,实验中调节金胶pH值和MabⅡ的标记量来优化复合物的性能。经过UV-vis、SEM、TEM等仪器表征,制备出稳定的、可应用于GICA的酒红色免疫金探针。  将上述制备的GNPs-MabⅡ复合物喷于结合垫上用来特异性结合样品中的HCG形成免疫复合物。α-HCG单克隆抗体(MabⅠ)固定于硝酸纤维素(NC)膜的检测区(T区)用来捕获标记有GNPs的免疫复合物。因此,当HCG存在时,GNPs将会在NC膜的T区聚集成肉眼可见的红色斑点。至于定量检测,样品浓度与T区红色斑点的灰度值线性相关,浓度在10~600 ng/mL范围内,灰度值-浓度对数值呈良好的线性关系。整个检测过程在15 min内完成且无需昂贵分析仪器进行定量分析。应用于人血清分析,可以达到临床检测要求。  大豆过氧化物酶具有耐热性能高、底物作用范围广、酸碱稳定性好、pH适用范围宽、原料廉价易得等优点;同时增强的化学发光分析方法比比色的ELISA灵敏度要高。我们希望研制SBP的酶标记增强化学发光试剂盒/生物芯片代替市面上广泛应用的辣根过氧化物酶(HRP)标记ELISA试剂盒。经ELISA实验验证,成功制备出可用于酶免实验的SBP-MabⅡ酶标抗体,酶和抗体最佳的偶联浓度比为1∶3。通过在Enspire多模式微孔板检测仪的初试,在SBP存在下,增强剂SPTZ和MORPH的加入可使化学发光增强近200倍,它们在Luminol-H2O2化学发光底物中最佳浓度分别为1.2 mM和0.6 mM。因此,SBP标记增强发光试剂盒/生物芯片的商品化生产具有切实可行的研究价值。
其他文献
该文以价格极其低廉的天然高岭土为原料,用浸渍法制备了具有高活性、长寿命的负载型银/陶瓷催化剂.首先考察了用不同的试剂处理的高岭土及其处理的重复次数对催化活性的影响,
对于二次函数顶点式这个知识的“播种”过程, 并将顶点式与其它表达式“统一”与“生长”,则可大大提高学生对知识的理解和掌握。  如遇到需要更精细图象的解题,则根据题意不同程度地将抛物线与y轴的交点(常数项c)及其关于对称轴的对称点、抛物线与x轴的交点在草图上表示出来。借助顶点式,掌握函数图象草图的作法,理解增减性与最值等的问题,从而为二次函数的实际应用作好准备。  (二)“平移”之果  历年佛山市中
该论文是基于对功能高分子微球的制备,以及微球表面接枝改性的研究.其主要内容如下:第一章,绪论,概括了制备功能高分子微球的一些主要制备方法,包括无皂乳液聚合,对高分子微球
效剂量低、广谱、安全性高等优点.为了进一步提高它们的生物活性和稳定性并扩展杀虫谱,进行基于大分子的有机合成反应研究,我们设计合成了28个新的阿(依)维菌素4″-位或5-位
在常压固定床反应器上,分别考察了顺酐(MA)加氢法和1,4-丁二醇(BDO)脱氢法合成γ-丁内酯的反应.结果表明,CuO/ZnO/AlO催化剂对顺酐加氢和1,4-丁二醇脱氢都具有良好的催化活性
该文利用恒温陈化法和均匀沉淀法成功的制备出了超细氧化锌.该方法具有设备简单,原料谦价易得,反应物初始浓度高,反应条件温和等特点,从而为氧化锌的工业化生产提供了一条可
该文制备了有机酸稀土盐,通过红外分析推断有机盐的配位方式.利用反相悬浮聚合制备具备荧光性能的亚微米粒子,通过电镜观察粒子的粒径及形貌.将聚合物粒子渗入聚氨酯复合膜中
液晶物质本身具有复杂的相态,是凝聚态物理所定义的一种软物质,或称之为复杂流体.关于液晶物质的研究一直是凝聚态物理的具有挑战性的重要课题之一.含液晶体系的热力学性质和