H2S对肝星状细胞TGFβ1表达水平的影响

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tju515
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目的:培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,给予外源性硫化氢干预,观察大鼠肝星状细胞中转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白及TGFβ1 mRNA表达情况,为探讨硫化氢延缓肝纤维化的机制提供进一步理论依据。方法:1.HSC-T6细胞的培养:体外培养HSC-T6,模拟肝纤维化状态下的大鼠肝星状细胞,以10%胎牛血清(DMEM低糖)培养基培养,接种后约8-10h贴壁,36h换液,约48h后细胞生长至培养皿底面积90%左右,胰酶消化处理,细胞传代周期稳定后进行下一步实验处理。2.实验分5组,空白对照组(不加硫氢化钠)、50μmol/L硫氢化钠组、75μmol/L硫氢化钠组、100μmol/L硫氢化钠组、200μmol/L硫氢化钠组,干预48h后终止细胞培养,提取细胞蛋白及总RNA,Western blot、RT-PCR法分别检测HSC-T6细胞中TGFβ1蛋白及TGFβ1mRNA的表达情况。结果:各实验组中均有TGFβ1蛋白、TGFβ1 mRNA的表达,与空白对照组相比,50μmol/L硫氢化钠组及75μmol/L硫氢化钠组TGFβ1蛋白及mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,100、200μmol/L硫氢化钠组TGFβ1蛋白及mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.外源性硫化氢对肝星状细胞中TGFβ1的表达有影响。2.外源性硫化氢可双向调节肝星状细胞中TGFβ1的表达,呈现为“钟型量效”,即低浓度硫化氢抑制其表达,高浓度时促进表达。硫化氢延缓肝纤维化的进展可能与其抑制TGFβ1的表达效应有关。
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