脑心肌炎病毒(Encephalomy ocarditis virus,EM CV)属小R N A病毒科心病毒属的成员,其宿主谱广泛,可引起人畜急性心肌炎、脑炎、糖尿病、生殖障碍等症状,给国内外养殖业及公共卫生造成巨大的经济损失和危害。近年来针对EMCV的研究愈来愈多,但该病毒的感染机制及致病机理仍不明确。本研究主要基于课题组前期酵母双杂交及病毒覆盖蛋白结合等实验筛选出的能够与病毒蛋白互作的热休克蛋白90β(Heat shock protein 90β,HSP90β)进行深入的探究,以期明确HSP90β在脑心肌炎病毒体外感染中的调控作用及其机制。通过上调或下调细胞中HSP90β的表达后接种EMCV,检测病毒拷贝数及病毒滴度,明确HSP90β对EMCV体外增殖的影响。利用qPCR及WB等实验进一步探索HSP90β对EMCV调控作用的具体机制,研究结果如下:1、上调宿主细胞中HSP90β的表达显著促进EMCV的体外增殖,反之,利用siRNA下调HSP90β的表达显著抑制EMCV的体外增殖,而且HSP90β的抑制剂GA也显著抑制EMCV的体外增殖。2、EMCV结构蛋白VP2与HSP90β共定位且相互作用,过表达VP2促进HSP90β的表达,并且能够抑制IFN-β的产生。3、上调HSP90β的表达能够抑制IFN-β的产生,利用siRNA下调HSP90β的表达可促进IFN-β的产生;进一步研究发现HSP90β是通过抑制MAVS、TBK1、IRF3进而抑制IFN-β的产生,其抑制作用呈浓度依赖性,并且HSP90β与MAVS、TBK1、IRF3均存在共定位并互作。结果表明,EMCV感染宿主细胞后,利用结构蛋白VP2劫持HSP90β,通过上调HSP90β的表达进而抑制IFN-β信号通路中的MAVS、TBK1、IRF3三种信号分子的表达从而抑制IFN-β的产生,实现病毒逃逸最终促进EMCV的体外增殖。本研究揭示了脑心肌炎病毒感染中的一种新的逃逸机制,为进一步深入开展相关研究奠定了基础,同时也为防控脑心肌炎病毒感染提供了新的思路,后期可以尝试使用HSP90β抑制剂进行抗脑心肌炎病毒感染相关治疗。