【摘 要】
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目的:通过观察AopE基因敲除小鼠的血脂水平及细胞焦亡相关蛋白表达和炎症因子相关m RNA表达变化,以及丹蒌片加栀子、连翘对Aope基因敲除小鼠的干预作用,探讨活血化瘀清热解毒法调控NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡抗AS的作用机制。材料与方法:40只SPF级健康AopE-/-小鼠自由饮食进水,适应性喂养7天之后,将40只小鼠随机平均分为5组,对照组、模型组、丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组以及辛伐他
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目的:通过观察AopE基因敲除小鼠的血脂水平及细胞焦亡相关蛋白表达和炎症因子相关m RNA表达变化,以及丹蒌片加栀子、连翘对Aope基因敲除小鼠的干预作用,探讨活血化瘀清热解毒法调控NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡抗AS的作用机制。材料与方法:40只SPF级健康AopE-/-小鼠自由饮食进水,适应性喂养7天之后,将40只小鼠随机平均分为5组,对照组、模型组、丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组以及辛伐他汀组,每组8只。对照组每日给予普通饲料,模型组、丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组以及辛伐他汀组,每日给予高脂饲料,自由进食,饮水不限。8周后,模型组、丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组以及辛伐他汀组继续高脂饲料喂养,同时灌胃给药,丹蒌片组,丹蒌片加栀子、连翘组给予相应的中药水溶液,每日早晚各一次,每次0.2ml,辛伐他汀组给予辛伐他汀溶液每晚一次,对照组和模型组则每日给予等体积的生理盐水灌胃。治疗4周后,检测各组小鼠血清中血脂TC、TG、LDL、HDL水平;苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠主动脉组织形态学变化;Western Blot方法检测主动脉中NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18、ASC、AIM2蛋白表达以及RT-qPCR技术检测主动脉中IL-18、IL-1β、MCP-1、MIP-1α的m RNA表达。结果:1.血脂水平检测结果显示:与对照组比较,模型组小鼠血清中TC、TG、LDL水平明显升高（P<0.05）,HDL水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组、辛伐他汀组小鼠血清中TC、TG、LDL水平明显降低（P<0.05）,HDL水平明显升高（P<0.05）。2.HE染色检测结果显示:与对照组比较,模型组小鼠主动脉组织中观察到大量炎性细胞浸润,泡沫样细胞增多,动脉粥样斑块形成;与模型组比较,丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组、辛伐他汀组小鼠主动脉组织中的炎性细胞浸润显著减少,泡沫样细胞减少,动脉粥样斑块明显减少。3.Western Blot方法检测主动脉中NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18、ASC、AIM2蛋白表达显示:与对照组比较,模型组小鼠主动脉组织中NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18、ASC、AIM2蛋白表达水平显著上升（P<0.05）;与模型组比较,丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组和辛伐他汀组小鼠主动脉组织中NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18、ASC、AIM2蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。4.RT-qPCR技术检测主动脉中IL-18、IL-1β、MCP-1、MIP-1α的m RNA表达显示:与对照组比较,模型组小鼠主动脉组织中IL-18、IL-1β、MCP-1、MIP-1αm RNA表达水平显著上升（P<0.05）,与模型组比较,丹蒌片组、丹蒌片加栀子、连翘组和辛伐他汀组小鼠主动脉组织中IL-18、IL-1β、MCP-1、MIP-1αm RNA表达水平显著下降（P<0.05）。结论:1.丹蒌片加栀子、连翘能够改善动脉粥样硬化小鼠的血脂水平,减少炎症细胞浸润及斑块形成,可有效防治动脉粥样硬化。2.根据实验结果显示,血清中炎症因子及细胞焦亡相关因子表达下降,表明丹蒌片加栀子、连翘抗AS的机制与调控NLRP3介导的细胞焦亡有关。
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