分子光谱法快速检测环境中的天然植物活性成分的新方法研究

来源 :重庆三峡学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sansancaicai
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近年来,随着人们生活水平的不断提高,越来越多的人民开始关注如何通过饮食来保持健康的体魄,如何利用食疗来赶走疾病。天然的、食药同源的理念不断深入人心。随着天然产物活性成分的功效与人群健康的关系受到日益关注,再加上植物活性成分本身来源丰富,各种抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化、抗肿瘤等优势的突出,使其在食品、医药及日化品等领域的应用越来越广泛。但是,同样存在弊端,植物活性成分构成的的化合物,其化学性一般较活泼、分子结构不稳定;一旦分离、提取方法不当,其分子结构就可能发生变化或使反应变质;难溶于冷水中生物利用率较低,导致人们对市面上的一些保健、护肤甚至食品的品质和含量的要求产生更高的期许。因此,开发出快捷、高效检测和鉴别市场产品中有效成分的品质、含量及其真伪的分析技术手段,是十分有必要的,同时也极大的激发了各界专家学者的研究兴趣。环境中的各类生态条件在自然界中相互影响,相互制约,综合的形成特定的生态环境,对植物产生影响。天然植物活性成分源于自然环境中的各种植物,但是随着人类的使用、投入生产以及自然的运动等各种方式,难免在大气环境中存在废弃、泄露的现象,导致植物活性成分利用率低还对环境造成污染。同时,由于植物活性成分的来源丰富,各种活性显著,人们盲目追求“越多越好”的价值观,物极必反恰恰对人类和环境都造成了危害。另外,很多不良商家依次为噱头,夸大其功效,由于市场的供不应求而实行以次充良的现象,导致很多以此为关键成分的食品、保健品以及化妆品成为劣质产品,加之处理不当而对环境造成严重污染。本文以黄酮类化合物姜黄素、香叶木素和花旗松素三种植物活性成分为研究对象,同时制备出具有荧光效应的L-组氨酸功能化的金纳米粒子(L-His-AuNPs)和L-半胱氨酸修饰的碳量子点(L-Cys-CDs)为检测平台。整个实验研究方法利用分子光谱法,以分子荧光光谱法和共振瑞利散射光谱法为主,辅之紫外-可见吸收光谱法、傅立叶近红外光谱法,同时采用XRD、TEM、Zeta电位图等表征手段进一步佐证、充实实验现象或进一步解释反应机理。实验报告中建立了荧光光谱法快速检测姜黄素的分析测定,通过共振瑞利散射光谱法灵敏检测到香叶木素,同时还利用荧光光谱法和共振瑞利散射光谱法两种不同的分析法同时分析花旗松素,经过比较确定以灵敏度更高的共振瑞利散射光谱法为检测手段。最终将建立的新方法用于实际样品中,实验结果满意。本论文在国家自然科学基金(No.21475014)和重庆市研究生创新项目(CYS19356)的资助下完成。其主要研究内容如下:1.基于L-组氨酸功能化的金纳米与姜黄素作用的荧光共振能量转移及其分析应用实验发现L-组氨酸功能化的金纳米团簇在与姜黄素作用下,其荧光信号被显著猝灭,我们据此建立了快捷检测环境中痕量姜黄素的新方法。实验以L-组氨酸功能化的金纳米(L-His-AuNPs)为探针试剂,在pH=7.1经过优化的条件下,将适量的姜黄素溶液加入到L-His-AuNPs中,发现L-His-AuNPs溶液原本明亮的荧光被显著猝灭。同时经过计算,发现猝灭的荧光强度随着姜黄素量的增加存在明显的正相关关系。经过实验证明,L-His-AuNPs的荧光强度猝灭程度与姜黄素浓度在5.0×10-7-1.1×10-5mol/L范围内具有良好的线性关系,检出限为3.1×10-88 mol/L。实验通过水样以及健康自愿者的尿样做分析应用,发现回收率在99.5%-105.0%之间,结果令人满意。进一步通过文献对比,更加说明该检测方法的简单、高效。2.利用L-组氨酸功能化的金纳米粒子为光散射探针快速检测天然植物活性成分香叶木素香叶木素作为天然黄酮类化合物的一种,具有诸多优异的化学性质和良好的生物活性。文章以L-组氨酸为修饰剂和还原剂,通过简单制备得到具有荧光特性的金纳米粒子(L-His-AuNPs)。在pH为4.5的BR缓冲溶液中,香叶木素的加入使得体系的光散射强度显著增强。据此,根据共振瑞利散射(RRS)光谱的强度变化,构建一种快捷检测香叶木素的实验方法。在最优实验条件下,L-His-AuNPs检测香叶木素的线性范围为7.0-140.0×10-88 mol/L,检出限为1.8×10-88 mol/L。将该方法应用于实际样品中香叶木素的检测,取得了满意的结果。3.L-半胱氨酸功能化的碳量子点对天然植物活性成分花旗松素的分析测定实验以柠檬酸为碳源L-半胱氨酸为修饰剂,采用简易的水热合成法制备出具有高荧光产率的碳量子点(L-Cys-CDs)。经实验分析发现,在Fe3+存在的情况下,L-Cys-CDs可同时作为荧光探针和共振瑞利散射(RRS)探针检测花旗松素。在最佳实验条件下,Fe3+可使碳量子点的荧光显著猝灭,当向上述体系中再加入花旗松素,发现猝灭体系的荧光得以恢复,且三者共存时体系的RRS强度显著增强。据此,文章通过构建两种光谱法择优检测花旗松素,最后确定以检出限更灵敏、线性范围更宽的RRS光谱法作为快速检测花旗松素的实验方法。在最佳实验条件下,RRS增强的强度与花旗松素的浓度在0.9-160×10-7mol/L范围内具有良好的线性关系,最低检出限为8.6×10-99 mol/L,相关系数为0.9975。且利用本实验方法检测标准样品的含量与出售方标注的高效液相色谱法测定值相比较,以及水样的加标回收实验,均得到了满意的结果。
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