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研究背景：Sansalvamide A(简称San A)是从海洋真菌(梭霉菌属)中分离出的一种环肽类物质，具有显著的抗肿瘤能力。目的：研究SansalvamideA衍生物H-10对人乳腺癌细胞系（MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）增殖以及端粒酶调控的影响。探讨不同浓度的H-10对人乳腺癌细胞系的形态，生长及其对端粒酶活性表达的影响，并且从基因和蛋白水平初步探讨其凋亡作用机制，为临床治疗乳腺癌提供理论和实验依据。方法：1将不同浓度的San A衍生物H-10（01020406080μM）与这两种乳腺癌细胞共同培养24h后，光学显微镜下观察细胞形态的变化。2采用MTT比色法检测不同浓度的San A衍生物H-10（01020406080μM）作用24h后，对人乳腺癌细胞（MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）生长增殖及活力的抑制作用。3采用生长曲线的方法检测40μM H-10作用于人乳腺癌细胞（MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）后，对细胞增殖能力的影响。4采用划痕试验检测40μM San A衍生物H-10作用于人乳腺癌细胞（MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）0h,6h,12h,24h后，对这两种细胞迁徙转移能力的影响。5端粒酶重复序列扩增法TRAP-PCR检测不同处理浓度的San A衍生物H-10(01020406080μM）对人乳腺癌细胞(MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）端粒酶活性的影响。6采用流式细胞术（Flow cytometry,FCM）检测40μM San A衍生物H-10作用于人乳腺癌细胞（MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）24h后，对细胞凋亡率以及细胞周期分布的影响。7RT-PCR法检测人乳腺癌细胞（MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）在不同浓度的San A衍生物H-10(01020406080μM）处理24h后，对c-Myc,Bcl-2,hTERT基因表达的影响。8免疫印迹技术（Western blot）检测人乳腺癌细胞（MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞）在不同浓度的San A衍生物H-10处理下，c-Myc,Bcl-2,hTERT蛋白表达的差异和变化。结果：1随着San A衍生物H-10药物浓度的增加，细胞开始出现皱缩，变圆，脱落，体积变小等形态学方面的改变，并且可见凋亡小体。而对照组细胞大小均匀，生长密集。2MTT实验结果显示，San A衍生物H-10对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的增殖具有显著地抑制作用，并且存在浓度依赖性，与对照组相比，差异具有统计学意义（P﹤0.05）。3人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231经40μM San A衍生物H-10作用后，生长增殖能力降低，且明显低于对照组，差异具有统计学意义（P﹤0.05）。4人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231经40μM San A衍生物H-10作用后，细胞的迁移速度减慢，且明显低于对照组，差异具有统计学意义（P﹤0.01）。5San A衍生物H-10对这两种乳腺癌细胞的端粒酶活性都有抑制作用，且随着药物浓度的增加活性水平逐渐减弱，呈剂量依赖性减少，并且对雌激素阳性的MCF-7细胞的作用更加明显（P﹤0.05）。6流式细胞术分析结果显示，40μM的San A衍生物H-10作用于人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-23124h后，细胞出现明显的凋亡峰，S期细胞增加，G0/G1和G2/M期的细胞减少（P﹤0.05）。7RT-PCR实验结果显示，随着San A衍生物H-10药物浓度的增加，这两种人乳腺癌细胞的c-Myc,Bcl-2mRNA水平稳定下降,且hTERTmRNA的表达水平也有所下降。与对照组相比，差异具有统计学意义（P﹤0.05）。8Western blot结果显示， San A衍生物H-10能下调hTERT,c-Myc,Bcl-2蛋白的表达水平显著降低（P﹤0.05）。结论：在体外，San A衍生物H-10能抑制人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的生长增殖，显著降低端粒酶活性，并且可能是通过下调hTERT，c-Myc和Bcl-2的表达从而抑制端粒酶活性和细胞增殖，促进细胞凋亡，发挥抗肿瘤效应。