禽副粘病毒-2的基因组序列测定与分析

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在该实验室已对PMV-2的流行病学、致病性、诊断方法、单抗制备等做了大量研究的基础上,该研究将进行PMV-2基因组的部分基因序列测定与分析,从分子水平上对该病毒做进一步的研究.该实验主要完成了下列工作:(1)收获四株PMV-2;(2)提取4株病毒的RNA,经RT-PCR,获得4株毒株的HN基因,同时首次测得F基因与HN基因之间的序列.(3)我们的研究还从分子水平上进一步论证了分离自猕猴的Murayama病毒与Yucaipa病毒有着非常密切的血清学关系,Murayama病毒可能是Yucaipa病毒或类Yucaipa病毒感染猕猴后的适应株.(4)在HN基因5端设计步移引物进行反转录,将反转录产物构建质粒文库,通过点杂交及Southern杂交,筛选阳性克隆,测序产物做BLAST比较,并与本科病毒的L基因的核苷酸序列、氨基酸序列进行了比较,进一步证实我们在国际上首次完成了PMV-2标准毒株的L基因3端的序列测定.(5)用Pfu保真酶扩增HN基因,连接入PTYB-2表达载体,成功进行了原核表达,为制备针对HN蛋白的单抗工作奠定了一定的基础.
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