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本实验分为二部分：
实验一 急性肺损伤大鼠肺泡上皮紧密连接变化的实验研究
目的:探讨急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡上皮紧密连接(TJ)的变化。
方法:清洁级SD大鼠21只，尾静脉注射内毒素(LPS)复制ALI模型，分别在注射LPS前(0h)及注射后2、4、6、8、12、16h观察以下指标(n=3)。测定肺组织湿重/干重(W/D)比值以判断肺水肿程度，125I白蛋白示踪法测定大鼠肺通透性(PPI)，免疫组织化学染色法观察大鼠肺组织中闭锁蛋白(occludin)，电镜观察肺组织中TJ和细胞间隙变化。
结果:与0hW/D[(3.83±0.04)]相比，2h、4h[(3.97±0.2)、(4.33±0.08)]W/D无显著差异，6、8、12、16h[(4.76±0.2)、(5.13±0.5)、(5.85±0.5)、(4.57±0.5)]均明显上升(P均＜0.05)，与12h相比，16hW/D显著下降(P＜0.05)。与0hPPI[(3.13±0.2)％]相比，2h和4hPPI[(2.99±0.5)％和(3.32±0.2)％]无明显变化，6、8、12、16hPPI[(4.31±0.5)％、(4.95±0.3)％、(5.16±0.3)％、(4.75±0.1)％]均显著增加(P均＜0.05)，而16hPPI明显低于12h(P＜0.05)。肺组织免疫组化显示，occludin在6h组明显出现破坏，并在12h组呈现严重破坏，16h破坏与12h相比减轻。电镜结果提示0h组可见细胞间隙紧密，并可见正常TJ结构，6h组细胞间隙增宽，12h组细胞间隙增宽并出现细胞内结构紊乱，16h细胞间隙增宽。
结论:LPS诱导的ALI肺泡上皮TJ明显破坏，肺泡上皮通透性明显增加。
实验二 肌动蛋白微丝对急性肺损伤大鼠肺泡上皮紧密连接影响的实验研究
目的:探讨肌动蛋白微丝对急性肺损伤大鼠肺泡上皮紧密连接(TJ)的影响。
方法:清洁级SD大鼠36只，内毒素(LPS)静脉注射复制急性肺损伤(ALI)模型，动物随机分为6组，分别为(1)对照组(N组)，(2)急性肺损伤(ALI)组，(3)微丝解聚剂(细胞松弛素，CytoD)组，(4)微丝聚合剂(鬼臼环肽，Ph)组，(5)急性肺损伤+解聚剂(AC)组，(6)急性肺损伤+聚合剂(AP)组。6h后处死动物。肺组织湿重/干重(W/D)判断肺水肿程度，125I-白蛋白示踪法测定大鼠肺泡上皮通透性(PPI)，免疫荧光共聚焦显微镜观察大鼠肺组织微丝密度的改变，电镜观察大鼠肺内TJ的改变，Western免疫印迹法测定大鼠肺组织闭锁蛋白(occludin)表达变化。
结果:(1)肺组织W/D改变：与N组(3.89±0.1)相比，CytoD组(4.59±0.6)、ALI组(4.71±0.5)、AC组(4.79±0.1)、AP组(4.36±0.3)W/D均显著增加(P均＜0.05)，Ph组(3.96±0.4)无显著变化(P＞0.05)；Ph组与ALI相比明显下降(P＜0.05)；CytoD组和AC组相比无显著差异(P＞0.05)。(2)肺通透性改变：与对照组[(3.13±0.2)％]相比，CytoD、Ph、ALI、AC、AP组的PPI[(5.95±0.3)％、(3.88±0.3)％、(4.32±0.5)％、(6.23±0.3)％、(4.10±0.4)％]均显著增加(P均＜0.05)；CytoD和AC组PPI明显高于ALI组(P均＜0.05)；而Ph组和AP组相比无显著差异(P＞0.05)。(3)荧光免疫显示，N组微丝结构清晰，ALI组微丝呈现散乱破坏，CytoD组微丝结构基本消失，AC组微丝破坏明显，Ph组则可见致密稳定微丝分布均匀，AP组微丝有较多破坏。(4)肺组织occludin含量变化：与N组[(0.73±0.09)]相比，CytoD组(0.33±0.08)、Ph组(0.55±0.10)、ALI组(0.56±0.07)、AC组(0.31±0.10)occludin含量均显著下降(P均＜0.05)，AP组[(0.74±0.18)]则无显著差异；与ALI组相比，AP组occludin含量显著增加(P均＜0.05)；CytoD组和AC组相比无显著差异(P＞0.05)，Ph组occludin含量明显高于AP组(P＜0.05)。
结论:肌动蛋白微丝的解聚可导致肺泡上皮TJ的破坏，肌动蛋白微丝的稳定可能可以减少ALI导致的肺泡上皮TJ的破坏。