Cox-2L启动子及SSTR2基因重组腺病毒载体的构建和鉴定

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胰腺癌恶性度高,是威胁人类生命健康的主要疾病之一,已成为西方国家第四位癌症致死病因[1]。据国际胰腺协会(IARC)的一项报告显示:2000年新发胰腺癌病例217000人,其中当年死亡213000人。到目前为止,外科手术仍是治疗该病的主要手段,不幸的是70%~75%的胰腺癌在确诊时已出现局部浸润或远处播散,不可能行治愈性切除,该病五年生存率仅为5~9%[2-3]。传统的化疗、放疗虽可延长生存时间,但效果甚微。为了改善愈后,急需发展新的治疗方法,而基因治疗正在为胰腺癌的治疗开辟新的天地。目前基因治疗胰腺癌的方法有:抑癌基因的替换[4];反义基因治疗[5];免疫基因治疗[6];受体基因治疗[7]等。在受体基因治疗中,研究人员发现:Ⅱ型生长抑素受体(SSTR2)与胰腺癌关系密切,生长抑素(SS)对表达SSTR2的胰腺癌细胞株生长有明显抑制作用,而对SSTR2表达缺失的细胞株生长无抑制作用,当SSTR2基因转入后者并表达后发现,生长抑素对其生长产生了抑制,故SSTR2基因被认为是胰腺癌的特异性受体基因,受到了重视[8-9]。SSTR2被证实在绝大多数胰腺癌中罕有表达[10-11],为提高SSTR2的表达率,须利用载体将SSTR2基因转入靶肿瘤中,而腺病毒载体是目前动物实验中较常用的载体,但其在临床上的应用受到限制,其中主要原因为:该载体对靶器官的转染率较低,致目的基因表达低[12];病毒颗粒在非靶器官浓聚,尤是在肝脏浓聚,致肝毒性,可产生致死性炎症反应[13]。肿瘤特异性启动子(TSP)的导入解决了这一问题。研究证实,在目前的八种TSP中,COX—2L启动子对胰腺癌有较强的亲和性及较高的转录活性[14-17]。本实验即构建以COX—2L为启动子,以SSTR2基因
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