【摘 要】
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H9N2亚型禽流感病毒是一种低致病性禽流感病毒,该亚型禽流感病毒于1994年在我国大陆鸡群中首次分离得到,随后该亚型禽流感病毒在全国各地蔓延开来,与其他病原体共同感染家禽可以导致较高的死亡率,严重影响我国养禽业发展。后来有研究也证实了人类也能感染H9N2亚型禽流感病毒,并且H9N2亚型禽流感病毒与高致病性禽流感病毒的爆发关系密切,防控该病在公共卫生上具有重要的意义,疫苗防控是防治该病主要途径之一。
【基金项目】
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国家重点研究发展计划（No.2017YFD0500701-4）； 二价灭活新型H9亚型禽流感疫苗（201704020017）； 中国农业研究系统；
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H9N2亚型禽流感病毒是一种低致病性禽流感病毒,该亚型禽流感病毒于1994年在我国大陆鸡群中首次分离得到,随后该亚型禽流感病毒在全国各地蔓延开来,与其他病原体共同感染家禽可以导致较高的死亡率,严重影响我国养禽业发展。后来有研究也证实了人类也能感染H9N2亚型禽流感病毒,并且H9N2亚型禽流感病毒与高致病性禽流感病毒的爆发关系密切,防控该病在公共卫生上具有重要的意义,疫苗防控是防治该病主要途径之一。由于H9N2亚型禽流感病毒变异频繁,早期的经典疫苗（SS株）已不能很好地控制近几年流行的H9N2亚型禽流感病毒,免疫后仍然发病的事件屡见不鲜,基于此现象,华南农业大学禽流感课题组对2012～2017年间从广东、湖南、福建、重庆和山东等省份分离鉴定的多株H9N2亚型禽流感病毒进行基因组HA序列分析,并与早期分离的代表毒株进行比对,旨在了解H9N2亚型禽流感病毒在遗传进化上的差异。结果显示:2012年以前中国流行的H9N2亚型AIV主要处在h9.4.2.3分支、h9.4.2.5分支和h9.4.2.6分支,随着疫情在中国广泛蔓延,2012年后h9.4.2.6和h9.4.2.3分支的分离率逐渐下降,h9.4.2.5分支的分离率上升。根据各分离毒株的分离地点、分离时间及遗传演化关系,选取h9.4.2.3分支、h9.4.2.5分支和h9.4.2.6分支中的代表性分离毒株制成油乳剂灭活疫苗,并进行血清学交叉反应试验、中和抗体交叉反应试验及交叉攻毒保护试验。结果表明不同分支的流行株之间抗原存在差异,试验表明处于BJ/94-like中h9.4.2.5、h9.4.2.6与h9.4.2.3分支的流行株之间抗原性存在明显差异（R值:0.14～1.0）。即便同处在h9.4.2.5分支的流行株之间也存在差异,明显分为两个不同的抗原群,h9.4.2.5分支的两个抗原群间的抗原差异可达16～64倍,并且通过鸡胚中和试验发现位于h9.4.2.5进化分支的A/Chicken/Hunan/HN/2015（H9N2）和A/Chicken/Shandong/SD/2014（H9N2）毒株对A、B群中和效价较高。综上所述,选取h9.4.2.5分支抗原性较好的A/Chicken/Hunan/HN/2015（H9N2）和A/Chicken/Shandong/SD/2014（H9N2）毒株作为候选的疫苗株,并用该候选疫苗株和市场上经典的A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）疫苗株进行免疫原性评估试验,试验结果显示候选疫苗株免疫原性好,保护率能达到90%以上,而市场上的经典疫苗免疫株原性较差,保护率只有66%,初步揭示A/Chicken/Hunan/HN/2015（H9N2）和A/Chicken/Shandong/SD/2014（H9N2）候选疫苗对目前流行的H9N2亚型禽流感病毒具有潜在的防御作用。为了满足生产需要,本研究设计A/Chicken/Hunan/HN/2015（H9N2）和A/Chicken/Shandong/SD/2014（H9N2）毒株的二价灭活疫苗,试验结果显示,二价疫苗跟单一疫苗产生的保护效果一致,并且免疫最低剂量（0.1 m L）即可以达到92%以上的保护率,产生的有效保护抗体能持续到24周,免疫质量和免疫保护效果较好,能达到临床使用要求,该二价疫苗为预防H9N2亚型禽流感的流行提供了有效的帮助。
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