新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）引起的一种烈性传染性疾病,通常以鸡、火鸡和许多其他鸟类为宿主。广东省处于中国陆地边境,气候温暖潮湿,家禽产业发达,是ND的高发地区,对当地禽类养殖业的发展造成了威胁。因此,在2016年8月～2018年12月期间,本课题组开展了对广东地区NDV流行病学监测工作。近年来,NDV的检测方法多且杂乱,缺少统一的标准。为了完善NDV的检测方法,提高检测效率,本研究选取5对公开发表的用于检测NDV的qRT-PCR引物进行评价,筛选出一对合适的引物,并应用于后期NDV的检测工作。在监测过程中,共分离出4株NDV病毒株,其中1株为鹅源的基因Ⅻ型NDV,将其命名为Goose/CH/GD/E115/2017（E115）。至今为止,我国只报道出6株基因Ⅻ型NDV分离株,相关研究较少。本研究对此分离株的全基因进行测序分析,并对F基因进行遗传进化分析,并对其鸡胚平均死亡时间（MDT）、雏鸡脑内致病指数（ICPI）、对SPF鸡和非免疫鹅的致病性、对这两种动物的种内种间传播能力、市面上现有常用商品疫苗对其的保护效果和其抗原变异情况等几方面生物学特性进行研究,力求对该基因型的NDV有一个更全面细致的了解。在试验过程中,对E115病毒株进行全基因测序和遗传进化分析,测序结果显示,E115病毒株基因全长15 192 nt,F基因中存在N240S和T496I替换。其跟2010年～2013年中国分离出的其他6株基因Ⅻ型NDV分离株位于同一分支,属于基因Ⅻb亚型,但跟秘鲁的基因Ⅻa亚型和越南的基因Ⅻd亚型位于不同的分支上。F蛋白裂解位点的氨基酸序列为112RRQKRF117,符合强毒的判定标准。为了了解E115病毒株对SPF鸡和非免疫鹅的致病性以及分别感染这两种动物之后的种内种间传播能力,经过试验测定,E115病毒株的鸡胚平均死亡时间（MDT）为57.4 h,雏鸡脑内致病指数（ICPI）为1.67,可判定该毒株为强毒株。但其对SPF鸡的致病性和种内种间传播试验结果表明,E115病毒株能使感染鸡有明显临床症状,表现为精神萎靡、食欲废绝、扭头缩颈,跛行,甚至瘫痪,但不出现死亡。在其肝脏、肺脏和肾脏等多个脏器中均能检测到较高的病毒滴度,其口咽和泄殖腔也均能检测到排毒,并在5 dpi排毒量达到最高。另外,在同组的3只同居鸡和3只2周龄的非免疫鹅的口咽和泄殖腔中也能检测到排毒,证明该病毒可通过鸡实现种内的传播以及对鹅的种间传播。非免疫鹅的致病性和种内种间传播试验结果显示,感染鹅可经口咽和泄殖腔排毒,排毒量在5～7 dpi达到高峰,其肝脏、肺脏和肾脏等多个脏器中也能检测病毒复制。与其同居的3只鹅和3只鸡能在口腔和泄殖腔中检测到病毒滴度。但在实验期间内,感染鹅和同居的鸡均没有出现临床症状和死亡。在两种商品苗对E115病毒株的免疫保护效果评价试验中,采用LaSota灭活疫苗和A-Ⅶ灭活疫苗进行免疫,结果表明:LaSota株疫苗组在3 dpi～5 dpi期间感染鸡的口咽拭子和泄殖腔拭子中可检测到排毒;A-Ⅶ株疫苗组在3 dpi感染鸡的口咽拭子和泄殖腔拭子中可检测到排毒。两组实验组中,同居组的鸡在整个实验期间内均也能检测到排毒。两种疫苗均能提供完全保护,但不能阻止E115在鸡群中传播。另外,E115病毒株抗原变异系数分析结果表明,E115病毒株与LaSota之间的R值为0.7783,E115病毒株与mGM之间的R值为0.8133,证明E115与LaSota和mGM两株毒株间抗原差异均不显著,即可判定为同一血清型。