新琼寡糖的益生元作用研究

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益生元是指能选择性促进肠内有益菌群的活性或生长繁殖,从而改善宿主健康的食物成分。它具有增殖肠道益生菌、减少有害菌生长、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等作用。作为研究最多的非消化性寡糖类物质,例如果寡糖、低聚木糖等,因其生物活性高及副作用小等优点成为研究的热点。新琼寡糖是一种以β-D半乳糖残基为还原性末端,以3,6-内醚-a-L-半乳糖残基为非还原性末端的寡糖,它是琼胶/琼脂糖经琼胶酶水解的产物,实验室前期研究发现新琼寡糖具有潜在的益生元作用,本文旨在进一步探讨新琼寡糖的益生元作用。实验流程为先用寡糖喂养小鼠四周,在此基础上再喂养高脂饲料两周(同时喂养寡糖),分别从生长性能、肠道菌群、血糖、血清食欲相关激素以及下丘脑中食欲相关基因的检测等方面来研究新琼寡糖对小鼠的益生效应。新琼寡糖的制备采用酶解法,以重组-琼胶酶AgaB为工具酶,琼脂为底物,降解产物超滤去除蛋白,薄层分析和凝胶层析分析显示得到主产物为新琼八糖、新琼十糖、新琼十二糖。以昆明种雄性小鼠作为研究对象进行体内试验,实验分为对照组、新琼寡糖组、果寡糖组,喂养四周,期间每隔一周测一次体重,每隔两周检测一次粪便菌群,实验结果表明两种寡糖组与对照组相比,小鼠体重显著降低;粪便菌群检测显示,新琼寡糖组与果寡糖组中双歧杆菌与乳酸杆菌含量较对照组均显著升高,且两组拟杆菌门数量增加,厚壁菌门下降。高脂饲料喂养两周,发现新琼寡糖显著抑制了高脂饮食后小鼠体重的增加,腹腔脂肪、肾脏脂肪、总脂肪及脂肪切片的结果与体重变化相对应。粪便菌群检测显示,益生元寡糖组益生菌仍然保持在较高水平,但高脂饮食对拟杆菌门与厚壁菌门的影响不明显。对食欲相关激素检测显示,益生元寡糖组血清抑制食欲相关的激素--胰高血糖素样肽1(GLP-1)含量显著升高;对另一抑制食欲相关的激素--肽YY (PYY)研究未发现明显变化。另通过对下丘脑食欲相关基因阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)检测发现,寡糖组含量稍有降低,豚鼠相关肽(AGRP)、胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)及神经肽Y(NPY)未发现差别。为研究新琼寡糖对小鼠血糖的调节作用,检测了空腹血糖及糖耐受,发现喂养高脂饮食后,添加益生元寡糖组小鼠空腹血糖降低、葡萄糖耐受性增强。综上所述,新琼寡糖能明显促进有益菌的增长,增强葡萄糖耐受性,减缓高脂饮食作用下体重的增长,并能影响血清中抑制食欲相关激素GLP-1的含量,进一步证明了新琼寡糖是一种潜在的益生元,并具有一定的肥胖预防作用。
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