第一部分:羟丁基几丁糖膜的制备、结构及性能的研究目的:羟丁基几丁糖膜的制备、表征、性能研究:制备羟丁基几丁糖膜,研究其微观结构、力学性能、生物安全性、生物相容性、降解性能、防粘连性能及对成纤维细胞的作用。评估羟丁基几丁糖膜作为硬脑膜替代材料的优缺点。方法:利用明胶与温敏性几丁糖反向温敏特性,采用明胶相变涂层的方式制备羟丁基几丁糖膜,电镜下观察其超微结构,对其拉伸强度及拉伸韧性进行检测,与正常硬脑膜进行比较,并探讨羟丁基几丁糖膜作为硬脑膜替代材料的生物相容性、可降解性、以及对成纤维细胞生长的影响,评估其是否具有防粘连作用。结果:羟丁基几丁糖膜干态下呈现极高的拉伸强度,湿态下呈现出较好的拉伸韧性,其拉伸韧性强于人硬脑膜。电镜下观察羟丁基几丁糖膜横切面及纵切面均为网状结构,呈蜂窝状的立体结构。羟丁基几丁糖膜具有良好生物相容性和防粘连作用,成纤维细胞培养结果显示出对成纤维细胞增殖的促进作用。结论:羟丁基几丁糖膜力学性能、生物相容性良好,对成纤维细胞生长有促进作用,具有良好预防粘连的作用第二部分:羟丁基几丁糖膜即时封堵脑脊液漏实验研究目的:羟丁基几丁糖膜即刻封堵脑脊液漏的研究:构建兔硬脑膜缺损致脑脊液漏的动物模型,使用羟丁基几丁糖膜修复,评价羟丁基几丁糖膜即刻封堵脑脊液漏的效果。方法:取健康成年新西兰家兔5只,在兔颅中线两侧对称造成两个1.2*1.2CM颅骨缺损,暴露硬脑膜,并造成0.8*0.8CM硬脑膜及蛛网膜缺损,使脑脊液外漏,实验组使用羟基丁几丁糖膜修复硬脑膜缺损;对照组仅造成相同大小硬脑膜及蛛网膜缺损不做处理。再于距两侧硬脑膜缺损约3CM颅骨中线处钻一小孔,采用头皮针导管沿小孔置入蛛网膜下腔,用20ML注射器抽取10ML美兰溶液缓慢沿导管推入蛛网膜下腔,观察双侧脑脊液外渗情况。结果:羟丁基几丁糖膜贴服性良好,可严密覆盖硬脑膜缺损,实验中向蛛网膜下腔注入美兰溶液,实验侧未见脑脊液从羟丁基几丁糖膜边缘渗出,对照侧美兰溶液渗出明显,5只实验动物结果一致。结论:羟丁基几丁糖膜可有效封堵硬脑膜缺损引起的脑脊液漏。第三部分:羟丁基几丁糖修复硬脑膜缺损远期效果的实验研究目的:羟丁基几丁糖膜修复硬脑膜缺损的远期效果:构建兔硬脑膜缺损动物模型,将羟丁基几丁糖膜(HBCM)与临床上使用的生物膜(牛肌腱I型胶原)进行对照研究,评价羟丁基几丁糖膜修复硬脑膜缺损的远期效果。方法:健康成年新西兰兔15只,颅中线两侧对称造成0.8×0.8CM硬脑膜缺损,左侧使用羟基丁几丁糖膜覆盖硬脑膜缺损作为实验组,右侧使用生物膜(牛肌腱I型胶原)覆盖缺损作为对照组,观察术后实验动物一般情况,术后30天、90天、180天分别处死5只实验动物,观察手术区域有无粘连、炎症反应等大体情况,切取手术区域组织行HE染色观察,行成纤维细胞计数,与正常硬脑膜进行比较,取术后90天实验组新生膜行电镜观察。结果:(1)一般情况:术后所有实验动物状态良好,无瘫痪、大小便失禁等神经症状,未见伤口感染。(2)大体观察:术后30天见生物膜(牛肌腱I型胶原)大部分被吸收,90天已被完全吸收,术后30天、90天、180天3个时间点均未见生物膜及其周围慢性炎症,3个时间点羟基丁几丁糖膜下均可见半透明新生膜覆盖脑组织,新生膜与脑组织及羟丁基几丁糖膜无粘连,脑组织颜色未见明显异常;术后180天未见羟丁基几丁糖膜被吸收迹象,羟丁基几丁糖膜容易取出,与周围组织无粘连。(3)HE染色:术后30天羟丁基几丁糖膜下新生膜中可见大量成纤维细胞及胶原纤维,术后30天生物膜侧组织中可见成纤维细胞、胶原纤维及大量脂肪细胞,成纤维细胞密度较羟丁基几丁糖膜侧低;两组成纤维细胞计数有统计学差异。术后180天,羟丁基几丁糖膜下新生膜中成纤维细胞明显减少,大量胶原纤维排列整齐,与兔硬脑膜高度相似,成纤维细胞计数较正常兔硬脑膜无统计学差异;术后180天生物膜(牛肌腱I型胶原)侧组织中可见大量脂肪细胞,成纤维细胞及胶原纤维少,与正常兔硬脑膜相似性低,成纤维细胞计数与正常硬脑膜有统计学差异;术后30天、90天、180天两组均未见明显炎性细胞浸润。(4)电镜:术后90天羟丁基几丁糖膜下新生膜电镜下可见大量胶原纤维,排列整齐。结论:羟丁基几丁糖膜修复兔硬脑膜缺损,不会导致炎症及粘连,远期膜下有新生膜形成,新生膜与兔正常硬脑膜相似性高,可以达到修复硬脑膜缺损的远期效果。