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猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2, PCV2)与猪群中发生的多种传染病相关,它已被证明是引起断奶仔猪多系统衰弱综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS)等疾病的重要病原体。PCV2同时也被证明与猪的其他一些疾病相关,例如,猪皮炎肾炎综合症,猪呼吸道疾病综合症,这些疾病现统称为猪圆环病毒病。该病的主要临床症状是消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、皮肤苍白及黄疸。本研究旨在用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活病毒作为免疫原免疫PCV2低母源抗体商品猪,再对免疫猪进行PCV2攻毒,对免疫后攻毒的试验猪的各项指标进行测定,以评价该候选疫苗用于预防PCV2感染的有效性。同时,以嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活疫苗及其活疫苗进行中间试验,以评价其在猪场条件下对商品猪的免疫保护效果。1.嵌合型PCV1-2灭活病毒对低母源抗体商品猪的免疫保护效力的研究应用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活疫苗为免疫原对42日龄的母源抗体效价1:10以下的商品猪进行免疫,在一免后14天进行第二次免疫,在第二次免疫后21天以PCV2野毒进行攻毒。试验结果表明,在二免后21天,所有免疫组的试验猪都表现出血清学的阳转变化,并可以检测到针对PCV2的较高效价的荧光抗体和中和抗体。在攻毒后21天剖检,攻毒对照猪的淋巴结和肺脏的大体和显微病变都比免疫组猪严重。同时,免疫组猪支气管淋巴结和血清中PCV2病毒的载量显著低于攻毒对照组猪(P<0.05)。综上所述,嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活疫苗可以有效地诱导免疫猪产生对PCV2感染的保护性免疫应答。2.嵌合型PCV1-2灭活疫苗的中间试验根据农业部《农业转基因生物安全评价管理办法》要求,进行嵌合型PCV1-2灭活疫苗在江苏省的中间试验。对免疫组的10头10日龄商品猪进行肌肉注射免疫,用间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescent assay, IFA)定期检测猪血清中抗体产生的情况,同时检测免疫猪的嵌合型PCV1-2病毒的排毒情况及其对试验场所附近非靶动物的影响和致病性等。试验结果表明,在免疫PCV1-2灭活疫苗后,试验猪产生明显的体液免疫应答,利用IFA方法检测到试验猪的血清中产生了较高效价的针对PCV2的荧光抗体。同时,PCV1-2灭活疫苗对试验猪的增重无明显影响,对非靶动物没有任何致病性以及其他方面的影响。3.嵌合型PCV1-2活疫苗的中间试验根根据农业部《农业转基因生物安全评价管理办法》要求,进行嵌合型PCV1-2活疫苗在江苏省的中间试验。对免疫组的10头10日龄商品猪进行肌肉注射免疫,用间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescent assay, IFA)方法定期检测猪血清中抗体产生的情况,同时检测免疫猪的嵌合型PCV1-2病毒的排毒情况及其对试验场所附近非靶动物的影响和致病性等。试验结果表明,在免疫PCV1-2活病毒后,试验猪产生明显的体液免疫应答,利用IFA方法检测到试验猪的血清中产生了较高效价的针对PCV2的荧光抗体。同时,PCV1-2活疫苗对试验猪的增重无明显影响,对非靶动物没有任何致病性以及其他方面的影响。