记忆包含获取、存储巩固及提取等阶段。其中关于记忆提取研究是非常之少,是因为人们之前一直以为记忆提取是记忆获取巩固后的被动输出。近期研究表明记忆提取环节是具有独立性的,可以主动去影响记忆呈现。恐惧记忆是个体对某种危险性情景或事件所产生强烈负面的情绪性记忆,过度恐惧则会使个体身心痛苦,严重的会引起各种精神心理疾病,影响个体的生活质量。研究恐惧记忆提取机制不仅有助于理解记忆本身神经生物学机制,也可促进治疗包括恐惧记忆在内因提取损伤导致的记忆障碍及精神心理疾病。然而对于恐惧记忆提取中分子机制研究仍然还不太清楚。本研究利用大鼠背景条件恐惧记忆范式,在恐惧训练0.5 h,24 h,48 h和72 h不同时间点后进行记忆提取,提取后0.5 h取大鼠海马组织进行转录组测序及结果分析,通过比较各实验组与对照组的基因转录变化发现海马脑区基因转录表达存在显著差异。接着对不同时间点基因转录变化进行时间序列分析,发现一类基因在训练后48 h进行记忆提取转录水平达到峰值并具有统计差异,这也提示训练后48 h时间点的关键性,将其简称“第49类基因群”。为探究第49类基因群转录变化是否与记忆提取相关,设计了三种训练模式（恐惧训练后记忆提取（RET）、恐惧训练后记忆不提取（NR）及无恐惧训练但记忆提取（Naive））用以探究其相关性。第一步需验证转录组分析结果的正确性,大鼠在背景条件恐惧训练后不同时间点记忆提取,提取后0.5 h取海马组织提RNA,进以结合基因转录水平时间序列分析结果、KEGG信号通路富集结果,如cGMP-PKG pathway、Prolactin pathway、Glutamatergic synapse pathway,及 GO 功能富集结果,选择出在学习记忆领域研究广泛的九个基因进行qPCR参考验证,如PIK3CA、ZIF268等。结果显示在训练后48 h提取时基因转录水平达到峰值,证明转录组分析结果准确。在此基础上也选择了在学习记忆研究领域较少的两个基因进行qPCR探索研究,如DPP9、CCND2,结果也展示出在训练后48 h记忆提取时转录水平达到峰值。第二步将上述基因进行NR和Niave模式相同方法验证,结果发现在此两种模式下,基因转录水平未发生变化。通过与RET结果对比,提示第49类基因群转录水平变化与记忆提取相关。基于转录组分析结果,本课题需要选择合适的基因进行探究对恐惧记忆提取的影响。最初选择了与Glutamatergic synapse pathway相关、具有第49类基因变化特征并在学习记忆领域研究较少的DPP9进行恐惧记忆训练后48 h记忆提取分子机制的研究。第一步大鼠经历背景条件恐惧训练后48 h记忆提取、训练后48 h记忆不提取及无训练48 h记忆提取,记忆提取后1h取海马组织提取蛋白,通过WB验证DPP9蛋白表达水平,结果显示仅在RET模式下,蛋白表达较对照组有显著差异,且蛋白增长倍数为对照组及其它组别的约1.6倍,说明在训练后48 h提取时干预DPP9蛋白具有可行性,也表明qPCR验证结果的准确性。第二步在进行大鼠背景恐惧记忆提取前对DPP9蛋白干预抑制,为此设计三种干预抑制模式:训练后48 h记忆提取前干预,七天后记忆提取不干预;训练后48 h记忆提取前不干预,七天后记忆提取前干预;训练后48 h记忆提取前和七天后记忆提取前皆干预。结果发现仅在干预条件下大鼠训练后48 h记忆提取显著降低,但不影响七天后记忆提取。第三步进行大鼠背景恐惧记忆训练前21天,在海马脑区注射DPP9蛋白过表达病毒,并选择弱背景恐惧训练方法测试行为学。结果表明过表达DPP9蛋白并不会提高恐惧记忆的程度,但会减慢恐惧记忆的遗忘速度。综上,本研究首次发现一类基因在训练后48 h进行记忆提取转录水平达到峰值,并命名为“第49类基因群”,此基因群为之后研究关于恐惧记忆提取相关分子机制提供了一系列可参考的候选基因;并在此基础上创新性发现干预DPP9对恐惧记忆提取的影响,而这些结果迄今为止未曾报道。DPP9不仅具有成为治疗记忆提取相关疾病的新治疗靶点潜力,而且在未来研究中以DPP9为起点方向,依据DPP9的蛋白互作网络等探索具有更强能力影响背景恐惧记忆提取的驱动基因,从而提供更为之有效的治疗靶点。