紫杉醇体外抗肿瘤活性及其诱导肿瘤细胞基因表达特性研究

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第一部分目的:比较紫杉醇、ZD1694和氟尿嘧啶(5-FU)体外抗肿瘤作用.方法:将不同浓度的紫杉醇、ZD1694和5-FU分别作用于8种肿瘤细胞(神经胶质瘤细胞株SK-N-SH、肝癌细胞株QGY7703、乳腺癌细胞株Bcap-37、胃腺癌细胞株SGC7901、宫颈癌细胞株HELA、急性髓细胞性白血病细胞株K562、急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60和卵巢癌细胞株HO8910),利用MTT法观察其作用的时间效应及剂量效应;在倒置显微镜下观察细胞的形态变化.同时我们还观察了不同浓度的紫杉醇作用于HL-60细胞0.5h后,去除药物,细胞继续培养24h、48h和72h的生长情况.结论:紫杉醇、ZD1694和5-FU对8种肿瘤细胞的生长均具有不同程度的时间及剂量依赖性的抑制作用,三种药物的抗瘤谱大小依次为紫杉醇>ZD1694>5-FU.紫杉醇短暂作用方式也能够抑制肿瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡.第二部分目的:了解紫杉醇与ZD1694联合应用对人白血病K562细胞、肝癌QGY7703细胞、急性白血病HL-60细胞及卵巢癌HO8910细胞的杀伤作用.方法:采用MTT法测定药物的体外杀伤作用,应用金氏公式进行联合用药分析.第三部分目的:探讨紫杉醇体外对肿瘤细胞细胞毒效应及其诱导凋亡的作用机理.方法:选用人急性早幼粒白血病细胞株HL-60,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,倒置显微镜观察细胞形态,用含14400个cDNA基因表达谱芯片分析1μmol/L浓度的紫杉醇作用HL-60细胞的基因表达变化情况.结论:紫杉醇能够明显引起HL-60细胞周期阻滞和细胞凋亡.基因表达谱芯片结果表明紫杉醇的作用是广泛的,并引起多种类型基因表达的改变,可能通过多个通路诱导细胞周期抑制和细胞凋亡,从而发挥其抗肿瘤作用.
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