铁是植物生长发育过程中重要的微量元素。铁在土壤中以二价铁离子Fe（II）和三价铁离子Fe（Ⅲ）的形式存在,但是大多为难溶性Fe（Ⅲ）,Fe（Ⅲ）需要在根际被还原为Fe（II）才能被吸收。在石灰性土壤中,植物对铁的吸收效率很低,常出现缺铁现象。为了适应缺铁情况,植物进化出两种吸收机制,而花生作为非禾本科植物利用还原机制（机制I型）吸收铁。基于前期转录组分析,推断bHLH转录因子AhFIT（即AhbHLH29）与AhbHLH100能够相互作用调控下游基因AhIRT1。为了验证这一假说,本研究从花生中克隆AhFIT和AhbHLH100的编码区序列,利用酵母双杂交和双分子荧光互补实验开展了AhFIT和AhbHLH100的互作研究。通过克隆AhIRT1的编码区序列以及AhIRT1的启动子序列,运用酵母异源互补、亚细胞定位、GUS活性分析、RT-q PCR以及异源过表达实验,分析IRT1的生理功能,为了解花生铁稳态调控机制奠定基础。通过构建系统发育树发现,花生的AhFIT与拟南芥的At FIT的亲缘关系最近,花生的AhbHLH100和拟南芥的AtbHLH100亲缘关系最近。酵母双杂交实验表明AhFIT与AhbHL100在酵母中具有相互作用。双分子荧光互补实验验证了AhFIT与AhbHL100在洋葱表皮细胞中互作,表明AhFIT与AhbHL100可以形成异源二聚体,调控下游基因表达。通过靶基因预测得出AhFIT含有一个G-box,能够与AhIRT1启动子上的G-box相结合,从而调控AhIRT1的表达。酵母互补实验得出AhIRT1在酵母中能够异源转运锌和镉,但是对锰没有作用。亚细胞定位实验中IRT1绿色荧光定位在洋葱的质膜上,说明AhIRT1定位在细胞膜上。GUS活性分析结果指出AhIRT1主要定位在拟南芥的根尖和叶片上,尤其在叶中分布更多,可能在根和叶中具有转运金属的作用。通过RT-q PCR实验表明在缺铁情况下AhIRT1表达上调,其中叶的表达量上调最明显,其次为根。综上所述,酵母双杂交以及双分子荧光互补实验表明,AhFIT与AhbHL100具有相互作用,可能调控AhIRT1的表达。AhIRT1受到缺铁诱导,定位在质膜上,在根尖及叶中表达,所以推测AhIRT1在根尖和叶中可能参与铁的转运。