【摘 要】
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目的:探讨高糖状态心肌细胞低氧诱导因子1α(HIF-1α)对线粒体膜通透性转化孔(mPTP)的调节机制,并揭示高糖状态下心肌缺血再灌注损伤加重的关键分子靶点。方法:运用H9c2心肌
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目的:探讨高糖状态心肌细胞低氧诱导因子1α(HIF-1α)对线粒体膜通透性转化孔(mPTP)的调节机制,并揭示高糖状态下心肌缺血再灌注损伤加重的关键分子靶点。方法:运用H9c2心肌细胞系建立缺氧复氧损伤模型,采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及CCK-8水平;TUNEL法检测细胞凋亡;通过激光共聚焦检测细胞线粒体膜通透性转化孔及线粒体膜电位改变;通过Western blot法检测HIF-1α及己糖激酶(HKII)的表达;免疫荧光法检测HKII含量及其分布。结果:1)与正常组相比较,缺氧复氧损伤及七氟醚后处理均可上调HIF-1α蛋白表达,其中七氟醚上调更为显著,HIF-1α可抑制mPTP开放,减少细胞凋亡;2)抑制HIF-1α其下游靶基因HKII表达受到明显抑制,mPTP通道开放增加,细胞损伤明显;3)抑制HKII后,HIF-1α丧失对mPTP的调节,七氟醚后处理失去其心肌保护作用;4)在高糖状态下,运用七氟醚后处理,并未减少心肌细胞凋亡。其HIF-1α及HKII的表达较正常七氟醚处理组无明显差异,但HKII存在向细胞膜聚集现象。结论:在缺氧复氧损伤中七氟醚后处理可上调HIF-1α蛋白表达,产生心肌保护作用。其机制可能是上调HIF-1α能够激活其下游靶基因HKII,抑制mPTP通道的开放,从而减轻缺氧复氧造成的心肌细胞损伤。高糖状态下七氟醚保护作用减弱或消失的原因可能是由于HKII发生转位导致HIF-1α失去了对mPTP通道的调控作用。从而增加了高糖状态下缺氧复氧损伤心肌细胞的坏死与凋亡。
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