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目的:研究Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-核转录因子E2相关因子(Nrf2)信号通路对子宫内膜癌细胞生长、转移及耐药的影响。方法:(1)选择代表Ⅰ型子宫内膜癌细胞的KLE和Ⅰshikawa细胞株和代表Ⅱ型子宫内膜癌的ARK2和SPEC-2细胞株,采用Western blot法测定子宫内膜癌细胞中Keap1-Nrf2信号通路Keap1和Nrf2蛋白表达。对Nrf2蛋白表达最高的ARK2细胞和Nrf2表达最低的KLE细胞采用Real-time PCR法测定其Keap1和Nrf2基因mRNA,MTT法检测两细胞株对紫杉醇和顺铂药物敏感性;对KLE和ARK2细胞进行Nrf2干扰,评估Nrf2干扰对肿瘤细胞耐药的影响。(2)对Keap1表达更低、耐药性更强的ARK2细胞株的Keap1基因过表达。Real-time PCR、Western blot、平板克隆实验、MTT法、裸鼠成瘤实验、Transwell迁徙、侵袭实验等方法研究ARK2细胞中Keap1过表达对Nrf2及下游靶基因表达、细胞生长、侵袭、耐药的影响。结果:(1)和正常子宫内膜组织进行对照,子宫内膜癌各细胞系中Keap1蛋白呈现不同程度的表达降低,而Nrf2蛋白则呈现不同程度的升高,表明信号通路均出现明显活化,活化程度最高的ARK2和活化程度最低的KLE细胞中Nrf2基因mRNA表达无明显差异,ARK2细胞中Keap1基因表达无论是mRNA还是蛋白水平的表达均要低于KLE细胞株,而Nrf2蛋白水平的表达在ARK2细胞株中则要明显高于KLE细胞株。Keap1表达较低的ARK2细胞较Keap1表达较高的KLE细胞耐药性更高。同时通过干扰Nrf2表达不能改变Nrf2蛋白表达较低的KLE细胞对化疗药物的敏感性,却能够有效的提高Nrf2蛋白表达较高ARK2细胞对化疗药物的敏感性。(2)ARK2细胞株中Keap1过表达能够明显下调Nrf2蛋白及下游基因ABCC2、g-GCS表达;MTT实验和平板克隆实验表明Keap1过表达能够降低ARK2细胞增殖能力;Keap1过表达能够降低ARK2细胞迁徙和侵袭能力;Keap1过表达能够显著提高ARK2细胞对顺铂的敏感性。结论:(1)Keap1-Nrf2信号通路在子宫内膜癌中出现明显活化,Ⅱ型子宫内膜癌细胞中该信号通路的活化程度要高于Ⅰ型子宫内膜癌细胞;Keap1对Nrf2蛋白表达调控是基于转录后的,且低表达的Keap1及高表达的Nrf2蛋白和肿瘤细胞的高耐药性有关。Keap1-Nrf2信号通路活化水平对化疗药物敏感性的影响可能存在一个“阈值”,当活化程度低于该“阈值”时,肿瘤细胞对化疗药物的敏感性处于同一水平,均显示为对化疗药物较敏感;而活化程度高于该“阈值”时,肿瘤细胞则表现出对化疗药物的显著升高的耐药性。(2)在Ⅱ型子宫内膜癌细胞株ARK2中上调Keap1基因表达能够有效的下调Nrf2蛋白及其下游基因的表达,并降低肿瘤细胞的生长、迁徙、侵袭能力,且能提高肿瘤细胞对紫杉醇和顺铂的敏感性。