避荫综合症SAS(shade avoidance syndrome)是喜阳植物响应“光”这一环境信号的改变,为了获得充足的光能而诱导的一系列形态及生理变化的适应机制。其中,快速的伸长生长是这一反应最显著的症状。高密度种植的农作物会产生避荫综合症。避荫反应会导致营养组分向快速伸长的器官(如茎和叶柄)转移,减少在其它组织和器官(如叶片,花,果实和储藏器官)的分配,从而降低作物的产量。研究避荫反应的机制,有效地减弱它对各种作物产生的不利影响,成为推动这一研究领域发展的动力。色氨酸转氨酶TAA1催化由L-色氨酸(L-Trp)形成吲哚-3-丙酮酸(IPA),进而合成生长素吲哚乙酸(IAA),是参与避荫诱导IAA的快速合成的关键性基因,在避荫条件下,TAA1突变体,sav3,无法正常诱导包括伸长生长在内的部分避荫反应。然而,目前我们并不了解遮荫信号是如何调控TAA1的。本论文从蛋白质翻译后修饰水平,研究生长素合成酶TAA1的分子调控机制。　　 首先我们通过对TAA1蛋白的序列进行分析,对可能的磷酸化位点进行预测。通过氨基酸序列的保守性分析,我们选择了可能被磷酸化修饰的第58位的酪氨酸,60位的丝氨酸,93位的酪氨酸,138位的酪氨酸,159位的酪氨酸,214位的苏氨酸,305位的苏氨酸进行定点突变并在细菌中表达纯化后,测定点突变TAA1蛋白的转氨酶活性。我们发现第60位,93位,214位,305位氨基酸突变为甘氨酸后,TAA1的转氨酶活性没有显著变化,说明这几个位点的突变不影响TAA1活性,它们如果存在磷酸化修饰的话对TAA1的活性的影响可能也不大。而第58位,138位,159位氨基酸突变为甘氨酸后TAA1的活性变的很低,甚至没有活性。说明这几个氨基酸是保持TAA1酶活所必需的,它们的磷酸化程度的高低可能会显著影响TAA1的酶活性,有可能在TAA1的表达调控中起调控作用。　　 其次我们利用Ezview Red ANTI-FLAG M2 Affinity Gel beads亲和层析介质纯化TAA1-FL蛋白,并通过双向电泳进一步区分经修饰后具有不同等电点(pI)的各TAA1蛋白点。最后对各点进行质谱鉴定,确定TAA1蛋白序列中第21位的丝氨酸和33位的苏氨酸存在磷酸化修饰。我们还发现PHYB缺失的突变体phyb9中的TAA1仅有一种等电点形式,且位置接近于Col-0中最酸端的点。因此我们推测phyb0中的TAA1蛋白可能存在多个位点的磷酸化修饰。