丝棉木果实多糖的提取分离及其生物活性研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengaitong1983
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丝棉木(Euonymus bungeanus)为卫矛科(Celastraceae)卫矛属(Euonymus)的落叶灌木或小乔木,是园林、绿地的常用观赏树种,全植物均可入药。因此丝棉木具有较大药用价值和经济价值。近年来丝棉木的研究报道很少,所以本试验以丝棉木果实为研究对象,对其多糖的提取工艺、分离纯化及其生物活性进行了系统研究,为丝棉木的药用价值开发提供依据。1、在对丝棉木果实多糖的提取工艺研究中,选用传统的热水煎煮法和超声波辅助水提法,并通过响应面法分别优化了两种提取方法的提取条件,以多糖得率为考察指标,筛选出最佳提取工艺。结果表明热水提取最佳条件为:料液比1:30,温度90℃,提取时间1.5 h,重复5次,平均得率为10.9%。与理论值相差0.22%。超声提取法最佳条件为:料液比1:31,温度49℃,提取时间24 min,重复5次,平均得率为10.88%,与理论值相差0.53%。2、在对丝棉木果实多糖的分离纯化工艺研究中,对水提醇沉得到的多糖中蛋白杂质通过Sevage法除杂并通过响应面软件优化得到最佳条件为氯仿与正丁醇比(V氯仿:V正丁醇)4.5:1,丝棉木果实多糖EBFP与Sevage试剂比(VEBFP:VSevage)2.5:1,震荡时间16.5 min,并进行5次重复,得到平均值为23.57%,与理论值相差0.9%,表明回归模型可行度较高。3、D101大孔树脂层析纯化到的多糖纯度为90.23%。理化性质结果得出丝棉木果实中含有大量还原性糖,薄层色谱检测结果显示可能含有果糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸,选用DEAE-52离子交换柱层析,洗脱出5个组分EBFP-I、EBFP-II、EBFP-III、EBFP-IV、EBFP-V,含量分别占55.21%、3.01%、11.24%、16.2%、5.14%。4、EBFP-I组分进行高效液相检测结果显示单糖组成含有葡萄糖、果糖、半乳糖。5、丝棉木果实多糖提取物具有较好的抗氧化活性、抑菌效果和体外抑瘤活性,结果表明:丝棉木果实多糖EBFP对羟自由基清除能力最强,最高达到60.34%,对DPPH清除能力较弱为53.1%,对超氧自由基清除能力最弱,最高为42.34%。在对丝棉木果实多糖EBFP抑菌试验可见对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有较好的抑菌作用,MIC值分别为大肠杆菌50 mg/mL、金黄色葡萄球菌25 mg/mL。实验组细胞出现明显的细胞凋亡现象,结晶紫方法检测丝棉木果实多糖对SP2/0细胞的IC50为37.753μg/mL,对正常细胞BHK无明显作用。
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