富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对糖尿病足溃疡的治疗及对其自噬调控的研究

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目的:通过临床实验,观察、评测自体富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对糖尿病足溃疡的治疗效果,并采用western blot、elisa等实验室方法,研究PRP对糖尿病足溃疡创面肉芽组织中微管结合轻链蛋白-3(LC3)、泛素结合蛋白(P62)以及IL-6、IL-10等因子表达的影响,探讨其对糖尿病足溃疡创面中自噬水平、炎症反应的调控,旨在为PRP治疗糖尿病足提供更丰富的理论依据和研究方向。方法:1.收集川北医学院附属医院整形美容/烧伤外科2018年9月至2019年11月期间住院治疗并符合相关纳入、排除标准的糖尿病足患者30例,随机分为PRP治疗组和对照组,每组各15例。两组患者入院后均接受规范的内科控血糖治疗并对创面彻底清创。PRP组患者在清创后行PRP凝胶覆盖创面治疗,对照组采用生理盐水纱布和凡士林纱布覆盖包扎。2.临床部分:比较两组患者治疗后第七天、第十四天、第二十一天的创面愈合率,治疗后连续五天的VAS疼痛评分,创面的愈合时间。3.实验室部分:采用western blot方法比较两组患者治疗前、治疗后二十一天创面肉芽组织中LC3、P62蛋白的表达水平,并采用elisa方法比较IL-6、IL-10的变化。4.采用SPSS23软件进行数据分析,两样本间计量资料采用t检验,计数资料采用卡方检验。检验水准α=0.05,以P<0.05认为差异有统计学意义。结果:1.PRP治疗组和对照组患者均无不良反应,未见相关并发症。2.两组患者的VAS疼痛评分总体呈下降趋势。从第三天开始,PRP组和对照组出现统计学差异,PRP组的VAS疼痛评分值更低(P<0.05)。3.两组患者创面总体呈愈合趋势。PRP组患者的创面愈合率在第七天、第十四天、第二十一天分别为(0.204±0.054,0.314±0.038,0.396±0.014),均显著高于对照组(0.122±0.027,0.164±0.018,0.204±0.013),结果具有统计学意义(P<0.05)。4.PRP组患者的愈合时间为(31.40±4.47)天,显著低于对照组(43.20±5.03)天(P<0.05)。5.Western blot结果显示,PRP组患者治疗后创面肉芽组织中LC3蛋白的灰度值(0.6805±0.0737)显著高于治疗前(0.3692±0.0471)(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的灰度值在治疗后(1.6984±0.1283)高于治疗前(0.6913±0.1133)(P<0.05);P62蛋白在治疗后的灰度值(0.4431±0.0396)低于治疗前(0.7361±0.0556)(P<0.05)。对照组中LC3、P62蛋白的灰度值在治疗前后无统计学差异(P>0.05)。PRP组患者治疗后创面的自噬水平升高,对照组无统计学意义改变。6.Elisa结果显示,PRP组患者创面的肉芽组织中治疗后的IL-6浓度(0.9174±0.1296 pg/ml)较治疗前(1.3118±0.1817 pg/ml)降低(P<0.05),对照组治疗前后 IL-6 浓度(1.2971±0.1521,1.2754±0.1774)无统计学差异(P>0.05)。两组患者治疗后IL-10浓度均升高(P<0.05),但 PRP 组(1.5801±0.072 pg/ml)高于对照组(1.5044±0.4429 pg/ml)(P<0.05)。结论:1.PRP治疗糖尿病足溃疡效果良好,无不良反应。具有操作方便、减轻患者疼痛、加速创面愈合、缩短愈合时间的优势。2.经过PRP治疗的糖尿病足患者,创面肉芽组织中LC3蛋白表达水平升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高,P62蛋白表达水平下降,自噬水平升高。3.PRP可能通过提高自噬水平加速糖尿病足溃疡创面的愈合。4.PRP可以抑制炎症因子堆积,改善糖尿病足局部微环境,这一过程可能和自噬相关。
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