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背景免疫治疗作为一种新的肿瘤治疗方式其中以TAA结合结合DC为基础的肿瘤治疗方式,成为肿瘤免疫治疗的研究热点。人端粒酶逆转录酶是新近发现的最佳的TAA,它在85%以上的肿瘤中为阳性,而在正常细胞中多为阴性。表达hTERT的细胞可获得永生性,而下调其表达可以使细胞老化或死亡。以往的研究表明,以人工合成hTERT多肽冲击人树突状细胞(DC),可有效激活体外抗肿瘤免疫反应。进一步研究结果表明,根据hTERT基因序列合成的单表位肽虽在体外可取得有效的抗肿瘤免疫效应,但在体内并无显著抗瘤作用。可能由于正常生理条件下蛋白的表位递呈是多个而非单一的,且不同表位之间在递呈时亦可能存在协同作用,因此多表位肽的研究便成为了趋势。但单纯混合多种单表位肽,并不能解决抗原性低下的问题。目的依据相关理论,通过人工合成树状串联hTERT表位肽,冲击髓样树突状细胞,诱导同源淋巴细胞的特异性抗瘤效应,探索一种更佳的肿瘤免疫治疗方法。方法人工固相合成四分支的树状串联hTERT表位肽(MAP)及其各分支单肽,免疫荧光检测hTERT的表达情况;PCR-SSP技术筛选HLA-A2+且HLA-DR4/11/15任意阳性者;免疫磁珠分选MDC,尼龙毛柱纯化T细胞,采用无血清培养基培养MDC和LC;ELISA检测不同时间点mDC的IL-12p70和淋巴细胞的TNF-a、INF-r分泌量;流式细胞技术检测MDC、LC的相关表面分子以及效应性T细胞对HLA-A2+型肿瘤A549、MDA-MB-231和SW480的杀伤率,并对结果进行分析。结果人工固相合成肽的纯度高;免疫荧光检测显示所三种肿瘤细胞都表达hTERT,且胞核大于胞浆;免疫磁珠分选所得MDC纯度高;经MAP和混合单肽刺激的MDC诱导的同源淋巴细胞对三种肿瘤细胞都有杀伤效应,但MAP组的杀伤效应大于混合单肽组。结论1、证实了人工合成hTERT的MAP肽和单肽能够通过MDC能诱导同源淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤效应。2、MAP肽组的免疫应答效能高于单纯混合肽组。3、MDC的高提呈效率,可作为特异性肿瘤疫苗的载体。4、在提高将来临床DC疫苗的安全性方面,无血清培养方法可提供重要保障。