圈养野生动物大肠杆菌耐药性流行病学研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 12次 | 上传用户:liu723590
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目的:调查福州动物园内动物源性、人源性、环境源性大肠杆菌的耐药性,并且对分离出的大肠杆菌菌株进行耐药表型、I类整合子检测研究;了解大肠杆菌对头孢类抗生素和喹诺酮类抗生素耐药基因携带的情况,为了解动物园来源细菌耐药的现状及指导兽医正确使用抗生素提供依据。方法:样本经过麦康凯琼脂和伊红美蓝琼脂平板划线分离纯化得到大肠杆菌;用PCR扩增uidA基因进行鉴定,并检测粘附性毒素基因fimA与致病性基因stxI、stxII、ST、LT。依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法来测定大肠杆菌菌株对8种抗生素的耐药性;用PCR方法进行I类整合子intI1基因、ampC基因、gyrA基因的检测。结果:(1)大肠杆菌的分离率从福州动物园154份样品中分离出大肠杆菌124株;其中动物源性、人源性和环境源性的大肠杆菌分离率依次为84.09%、79.55%、68.18%;环境中大肠杆菌的分离率相对动物源性、人源性较低。(2)大肠杆菌中毒力相关基因的检测121株大肠杆菌中,有85株携带粘附性毒素fimA基因,阳性率占70.2%。其中,动物源性、环境源性和人源性的阳性率分别为68.91%、66.67%、75%。没有扩增出致病基因stxI、stxII、ST、LT。(3)不同来源大肠杆菌的耐药性动物源性大肠杆菌中,其对四环素的耐药率最高,平均为63.51%。对头孢唑林的耐药率也很高,平均为41.89%。草食动物中复方新诺明的耐药率最高,为56.52%,对庆大霉素、环丙沙星、氨苄西林敏感;肉食动物、鸟类、杂食动物、两栖类中四环素耐药率最高分别为45.45%、75%、75%、100%;其次为复方新诺明和头孢唑林。环境源性的E.coli中,对复方新诺明、四环素、氨苄西林、头孢唑林的耐药性较高,分别为93.33%、80%、80%、66.67%。土壤样本中大肠杆菌对复方新诺明耐药性为最高,达到90.91%,其次为四环素、氨苄西林、头孢唑林的耐药性较高,耐药率分别为72.73%、72.73%、72.73%。水样样本中大肠杆菌对复方新诺明、氨苄西林、四环素的耐药率达到了100%,对庆大霉素、环丙沙星、头孢噻肟敏感。人源性的E.coli中,其对复方新诺明、四环素、氨苄西林和头孢唑林的耐药率很高,分别为87.5%、62.5%、59.38%、56.25%。其对环丙沙星较敏感。动物园中兽医、饲养员中大肠杆菌对复方新诺明耐药性最高,达到81.82%,其中对头孢噻肟敏感。普通人群中复方新诺明达到90.48%;其次为头孢唑林、四环素、氨苄西林耐药率分别为66.67%、57.14%、57.14%。(4)大肠杆菌多重耐药性动物源性分离的大肠杆菌的耐药谱种数为最多有29种;环境源性大肠杆菌中耐药谱种类为8种;人源性大肠杆菌中耐药谱种类为14种,动物源性的耐药菌中,有19株敏感,3重以上的耐药菌有48株,占到64.86%。(5)耐药基因、I型整合酶与耐药性的联系共检测含ampC基因菌株有114株,占85.95%,对β-内酰胺类抗生素耐药性较高;含gyrA基因菌株有101株,占83.47%,对喹诺酮类抗生素耐药性较高;含有int I1基因菌株,检测出30株,检出率为24.79%,耐药菌株多为5-8重耐药菌。结论:(1)分离的121株大肠杆菌中对复方新诺明耐药率最高,其次是四环素、头孢唑林、氯霉素、氨苄西林,对头孢噻肟、庆大霉素较为敏感。(2)fimA基因的存在说明大肠杆菌含有F1菌毛毒力因子。(3)含有ampC、gyrA基因的菌株分别对β-内酰胺类、喹诺酮类抗生素耐药性较高,大肠杆菌耐药表型与基因型的具有相关性。(4)intI1整合酶基因与多重耐药具有相关性。
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