量子点及量子点/聚苯乙烯荧光微球的制备及其用于降钙素原快速免疫检测的研究

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量子点作为一种新型的荧光材料具有独特的光学性质,如具有宽的紫外可见吸收光谱和窄而对称的荧光发射光谱,且具有较高的量子产率。这些特性赋予了量子点广阔的应用空间和前景。但是量子点的尺寸小,单个量子点荧光强度有限,用于生物标记时暴露在复杂的生理环境中,容易破坏量子点的荧光稳定性。所以将量子点包载在聚合物微球中形成量子点荧光微球。量子点荧光微球既能提高单个微球的荧光强度,而且易修饰,便于与生物大分子结合,非常适合生物荧光标记方面的应用。降钙素原(PCT)作为人体辅助判断真菌、细菌的感染程度的重要指标,对于感染性疾病及其并发症的早期诊断、及时治疗的临床判断尤其重要。而现在常见检测PCT的方法不是无法定量就是价格昂贵,不利于PCT检测在基层社区医院的推广。荧光免疫层析法具有快速定量、灵敏度高及操作简便等优点,随着荧光免疫层析检测PCT的深入研究,为预防和治疗感染性疾病提供便利。所以发展快速定量和操作简便的荧光免疫层析检测PCT具有重大意义。本文旨在合成高量子产率的CdSe/CdS核壳量子点。为了提高其在聚苯乙烯微球(PS)中的包载效果,使用正十二烷基硫醇(DDeT)对量子点配体交换改性,得到了新型的量子点/聚苯乙烯荧光微球。并且经PAH和PSS聚电解质修饰后制备荧光标记PCT抗体探针,用于荧光免疫层析快速且高效的检测PCT。本文具体工作主要分为以下三个方面:1.通过热注入法制备CdSe量子点,经过原位提纯后,再通过热循环单体耦合法(TC-SP)制备高效发光的CdSe/CdS核壳量子点。通过紫外可见光谱、荧光发射光谱、透射电镜和X衍射等仪器表征CdSe和CdSe/CdS量子点的结构和光学性能。实验结果表明CdSe成功外延生长CdS壳层,所制备的CdSe和CdSe/CdS量子点都是面心立方的闪锌矿型结构,具有较高的量子产率和尺寸均一性。通过正十二烷基硫醇(DDeT)交换CdSe/CdS量子点的油胺(OAm)配体,配体交换后量子点的光学性质不变,溶解度得到大幅度提高,对后续制备荧光微球产生积极影响。2.通过乳液聚合方法成功将配体交换后的CdSe/CdS量子点包载到聚苯乙烯微球中,得到了量子点/聚苯乙烯荧光微球。结果表明包载于微球内部的量子点分布较均匀,而且具有较高的包载效率。乳液聚合成功将油相量子点成功转移在水相中,微球依然保持窄而对称的荧光发射光谱,并且荧光发射光谱的位置不变,同时证明了配体交换后量子点的包载效果更好。3.量子点/聚苯乙烯荧光微球成功修饰PAH和PSS聚电解质,与抗降钙素原单克隆抗体结合,制备荧光标记抗体探针。构建了荧光免疫层析试纸条,并对试纸条进行了优化和性能评价,通过荧光免疫分析仪可以快速灵敏定量检测PCT,具有极大的应用潜力。
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