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背景:肺癌已经成为全世界最常见的恶性肿瘤,在恶性肿瘤相关死亡原因中占第一位。目前肺癌的治疗是以综合治疗为主,化学治疗在肺癌治疗中有着重要地位,耐药性产生是化疗失败的主要原因之一。克服耐药性的方法之一是使用逆转剂,在肺癌治疗中,DDP是主要的化疗药物,易产生耐药,影响化疗效果。重组人血管内皮抑素(恩度Endostar)作为一种血管内皮抑制剂,具有靶向明确、毒副作用小、不产生耐药性等特点,与化疗联合可增加化疗疗效。Endostar化疗增效可能与其逆转肿瘤细胞对化疗药物的耐药性有关。本研究主要探讨重组人血管内皮抑素(恩度Endostar)对DDP耐药性的逆转作用及其机制,进一步探讨Endostar化疗增效的机制。目的:探讨重组人血管内皮抑素(恩度Endostar)逆转A549/DDP细胞耐药的发生及逆转机制。方法:本实验采用人肺腺癌细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP作为研究对象,以DDP与Endostar两者联合及单独给药的方式分别作用于人肺腺癌细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP,作用时间72小时,观察不同给药方式在同株细胞之间的不同及不同株细胞间差别。采用MTT法检测Endostar对A549/DDP细胞耐药性的逆转作用;用流式细胞仪测定A549/DDP组、DDP组、Endostar联合DDP组分别作用于A549/DDP细胞后的相对荧光强度;RT-PCR法检测DDP组、Endostar联合DDP组、Endostar组、分别作用于A549/DDP细胞后的耐药基因的mRNA表达情况,并且设立A549细胞对照组、A549/DDP细胞对照组,同时也检测对照组的耐药基因的mRNA表达情况,检测的耐药基因包括:谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、拓扑异构酶Ⅱ(TOPO-Ⅱ)及肺耐药蛋白(LRP).结果:1.DDP对A549细胞半数抑制浓度(IC50)为(0.72±0.05) ug∕ml,对A549/DDP半数抑制浓度(IC50)为(11.54±0.64) ug∕ml。可见,A549/DDP对DDP的耐药指数为16。Endostar联合DDP对A549/DDP半数抑制浓度(IC50)为(2.0±0.1) ug∕ml。逆转倍数(RF)为5.77,相对逆转率(RRR%)为88.2℅,提示Endostar具有逆转A549/DDP细胞耐药的作用。Endostar联合DDP对A549细胞半数抑制浓度(IC50)约为(0.25±0.06) ug∕ ml,提示Endostar与DDP在体外有明显的协同作用。2.流式细胞仪结果显示DDP荧光强度:单药DDP组、A549/DDP对照组、Endostar联合DDP组的相对荧光强度分别是:1618±82.31、974±13.45、2958±63.96,统计学分析P<0.05,提示Endostar可以增加细胞内的铂含量,增加治疗疗效。3.RT-PCR检测结果显示:A549/DDP细胞内的GST、TOPO-Ⅱ基因的mRNA表达均较A549细胞高,DDP联合Endostar组处理后的A549/DDP细胞内GST、TOPO-Ⅱ基因的mRNA表达均有明显下降,各组比较均P〈0.05,有统计学意义。各组细胞中均有LRP的表达,A549/DDP细胞中LRP表达较A549细胞高,经Endostar联合DDP处理后,A549/DDP细胞中的LRP的表达略下降,各组比较均P>0.05,无统计学意义。结论:Endostar能逆转A549/DDP对DDP的耐药性,Endostar逆转DDP耐药性的机制可能是减少A549/DDP细胞内GSH和TOPO-Ⅱ基因的mRNA表达,增加了A549/DDP细胞内的含铂量。