疼痛,是由于机体遭受外界的损伤性刺激后,初级伤害性感知神经元被激活而引起,并表现为不愉快的情感体验。其影响人群大、范围广,以至于世界卫生组织(WHO)将疼痛与体温、呼吸、脉搏、血压相并列,称为临床第五大生命体征。国际学术界也提出:缓解疼痛是基本人权。伤害性疼痛是由于外周伤害性感受器被激活而引起,属于生理性疼痛的范畴,其作用是警告以及保护机体、躲避伤害。而病理性疼痛的患者在临床中通常表现为持续性或慢性病程,其产生是由于中枢神经或外周神经的损伤或疾病而引起,并且这种类型的疼痛对机体并不具有保护作用,反而带给患者深刻的痛苦。在慢性疼痛中,最常见、最难治的是:神经病理性疼痛(Neuropathic Pain,NP)。随着对NP认识和研究的不断深入,2011年国际疼痛学会(IASP)将定义更新为:躯体感觉神经损伤和(或)疾病而引起的疼痛。NP区别于其他疼痛的突出特点有以下三点:自发性疼痛、痛觉过敏和痛觉超敏。目前临床对NP治疗主要包括:药物治疗;和以心理治疗、物理手法治疗、微创介入疗法和外科手术为主的非药物治疗。但是临床上其总体缓解率却只有40~60%。非药物治疗价格昂贵;药物治疗是各种治疗手段中最基本、最常用的,也最容易为患者所接受。但是,目前广泛应用的治疗药物如:麻醉性镇痛药、三环类抗抑郁药、非甾体类抗炎药和阿片类药物等,因副作用较大、有些易产生依赖性,限制了其应用。这就促使我们去探讨更多的治疗手段和方式,研发出疗效更好、副作用更少、依赖性更小的药物。比利时优时比(UCB)公司开发的拉科酰胺,属于新型功能性氨基酸抗惊厥药,NMDA受体甘氨酸结合位点拮抗剂,成人部分癫痫发作是该药最初批准上市时的主要适应症。之后的研究发现拉科酰胺具有双重作用机制:一方面,该药对电压依赖性钠离子通道(VGSC)慢失活状态、非快失活状态敏感,但对其快失活状态不敏感;另一方面,它也能作用于海马、丘脑等位点的塌陷反应介导蛋白-2(CRMP-2)。之后的研究进一步发现,拉科酰胺对Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8敏感,越来越多的研究证实:Nav1.8与疼痛信号的传递过程密切相关,甚至可能是潜在的闸门,在现代药理学研究中Nav1.8已被作为神经病理性疼痛药物研究和治疗的重要靶点。据文献报道,拉科酰胺在临床的研究和应用中,能够在一定程度上缓解患者癌性痛、骨关节炎性疼痛、肿瘤放化疗后疼痛以及糖尿病周围神经痛[3,4,5,6,7,8];在动物实验中,拉科酰胺也表现出不同程度的抗伤害性痛的作用,如在大鼠坐骨神经损伤模型和大鼠脊神经结扎模型上显示出良好的镇痛效应脊髓背角又被称为脊髓水平的“痛觉调控中枢”,但拉科酰胺在脊髓背角的镇痛机制尚不清楚。因此探讨其对脊髓伤害性神经通路的作用机制,对将拉科酰胺开发成为理想的镇痛药提供功能基础。实验一:拉科酰胺对大鼠神经损伤引起的神经病理性疼痛的镇痛作用目的:应用大鼠脊神经结扎模型,观察腹腔内注射拉科酰胺镇痛作用的时程和剂量效应关系。方法:180~230 g SD雄性大鼠,术前测定其机械性缩足反射阈值,按照Kim的方法结扎大鼠腰5-6脊神经,制作脊神经结扎模型(SNL模型)。剔除造模失败的动物后,待大鼠神经病理性疼痛形成稳定(通常在术后三天),再随机分为三组:溶剂对照组、大剂量LCM处理组(100 mg/kg)和小剂量LCM处理组(50 mg/kg)。LCM用生理盐水稀释,腹腔单次注射LCM作为LCM处理组,而腹腔注射等体积生理盐水作为溶剂对照组。于注药后5、15、30、45、60、90、120、150 min分别测量机械性缩足阈值,观察拉科酰胺的镇痛作用结果:大鼠术侧机械性缩足反射阈值升高的情况只发生在LCM高剂量组,并且与溶剂组和小剂量处理组相比具有统计学意义(P<0.01;SNK-q)。该作用最大值出现在腹腔内注射后约40 min,并且持续到注药后70 min仍未完全消失。而健侧、拉科酰胺低剂量组及溶剂对照组PWMT值于加药前后均没有明显改变(P>0.05)。实验二:拉科酰胺对大鼠伤害性感觉通路突触传递的作用目的:观察拉科酰胺对大鼠脊髓伤害性细纤维(Aδ纤维、C纤维)介导的兴奋性突触后电流(e EPSCs)的影响。方法:雄性SD大鼠,3~5周龄,80-100g,人工脑脊液心脏灌注后分离脊髓,在脊髓腰膨大做带后根的矢状位切片。采用全细胞记录的方式记录脊髓背角Ⅱ层神经元,输入阻抗<10 MΩ,电压钳制-70 mv,记录稳定10min后,观察拉科酰胺对伤害性细纤维支配的SDH神经元突触传递的影响。结果:(1)拉科酰胺能够抑制伤害性细纤维介导的单突触II层神经元恒压电刺激后根诱发的e EPSCs峰值,其作用呈现剂量依赖性。(2)拉科酰胺并不影响脊髓背角II层神经元s EPSCs放电幅度,但对频率表现为抑制(P<0.01;K-S test)。结论:1.拉科酰胺后对伤害性细纤维(Aδ纤维、C纤维)e EPSCs表现出抑制作用,且呈剂量依赖性。2.拉科酰胺对脊髓背角浅层神经元s EPSCs的频率表现为抑制作用,但不影响其放电幅度,提示拉科酰胺的作用位点在突触前膜。3.对大鼠SNL模型,腹腔内单次注射高剂量的拉科酰胺可以显著提升大鼠手术侧机械性缩足反射阈值,该作用最大值出现在注射后约40min,并且这一作用持续到注药后70min仍未完全消失,持续时间大约25min。而健侧、拉科酰胺低剂量组及溶剂对照组PWMT值于加药前后均没有明显改变。