【摘 要】
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遗传标记经过半个多世纪的发展,经历了形态学标记、细胞学标记、生化标记阶段,发展到分子标记阶段。分子标记以其快速、简便等优点发展迅猛,近十几年来已成为遗传操作和植物育种
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遗传标记经过半个多世纪的发展,经历了形态学标记、细胞学标记、生化标记阶段,发展到分子标记阶段。分子标记以其快速、简便等优点发展迅猛,近十几年来已成为遗传操作和植物育种的重要工具,广泛用于筛选连锁标记、定位重要基因、构建遗传图谱及辅助育种等工作中。 类病变坏死突变(disease lesion mimic)是指植物在没有明显逆境、损伤或病原物侵染时能自发的形成细胞死亡,在叶片上形成坏死斑,其症状与病原物侵染后形成的坏死斑非常相似。这种突变体是研究超敏反应(hypersensitive response HR)的机理及激活机制等的有利工具,对揭示植物的抗病反应机理,增加植物的广谱抗性具有重要意义。 1998年程祝宽在中籼3037诱变材料中发现了一种新的水稻类病变坏死突变体,初步的遗传学分析确定突变由隐性单基因控制。本研究利用该突变体材料为母本与粳稻02428杂交,连续自交两代得到F3定位群体,采用SSR和RAPD技术,找到此突变相关基因的RAPD标记,并对此基因进行了遗传定位,为进一步图位克隆此基因做准备。主要研究结果如下: 1 通过对此突变体进行的无菌培养、遮光、稻瘟病菌接种及曲利本蓝染色等形态学鉴定,初步确定此突变体不受病原物诱导,与细胞死亡有关,对稻瘟病的抗性有增强的趋势,而且受光的控制。 2 在选用的190对SSR引物中位于第八染色体短臂着丝点区域的RM126和RM310的扩增产物与突变性状紧密连锁,其遗传距离分别为2.9cM和4.3cM,以往定位的类病变基因还没有定位在第八染色体,可推测,这个突变基因可能是一个新基因,暂时定名为Sp112(t)。 3 选用了500个RAPD引物分别对亲本及群体扩增,经6次重复实验,引物OPI11和OPL03在亲本及群体间有稳定的差异片段,此差异带与突变性状紧密连锁,因此OPI11-556和OPL03-944可作为此基因的RAPD标记,这两个标记与目的基因的遗传距离分别是0.6cM和5.6cM。序列同源性比较发现OPI11-556序列与一个抗稻瘟病基因Pib有高度同源性。
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