目的:头颈鳞状细胞癌的发病率为癌症中的第六名,且在发展中国家趋于逐年攀升。舌鳞状细胞癌（TSCC）是最常见的头颈鳞状细胞癌,其特点是增殖率高,淋巴结转移率高,发病率逐年递增,且发病人群朝向年轻化和女性化发展。回顾过去,尽管手术、放疗和化疗等治疗手段的发展日新月异,但舌鳞癌晚期患者的预后仍不尽如人意,主要的致命原因为局部复发以及远处转移。近年来分子靶向治疗成为肿瘤综合治疗的研究热点,为肿瘤的治疗提供了新途径。因此,寻找高效特异、毒副作用小的治疗靶点具有积极的临床意义。长链非编码RNA（LncRNA）DANCR因维持表皮细胞干性被首次报道。研究发现,LncRNA DANCR能够促进前列腺癌、胃癌、结肠癌等恶性肿瘤的侵袭和转移;然而,其生物学作用及其在TSCC进展中的潜在机制尚未得到明确的阐述。本研究采用体内、外实验来探寻DANCR对TSCC的作用及其分子机制,为揭示肿瘤的恶性生物学特性以及舌鳞癌的治疗提供新见解、新方向。方法:1.在四种TSCC细胞系中（SCC9、TSCCA、TCa-8113、CAL-27）沉默或过表达DANCR后,通过MTT、划痕及Transwell实验,来观察DANCR在TSCC细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用。2.通过双荧光素酶报告验证DANCR与miR-135a-5p之间的靶向关系。在TSCC细胞中通过MTT、划痕和Transwell实验,验证miR-135a-5p的功能作用。Western blot及qRT-PCR检测TSCC细胞中Krüppel样转录因子8（KLF8）随DANCR或miR-135a-5p的变化而变化的规律。3.以miR-135a-5p/KLF8轴为重点,进一步探讨DANCR如何影响TSCC细胞恶性表型的分子机制。对miR-135a-5p及KLF8进行功能rescue实验:观察TSCC细胞中miR-135a-5p抑制剂对DANCR沉默介导的细胞增殖、迁移、侵袭抑制的逆转情况;观察沉默KLF8逆转miR-135a-5p抑制剂介导的细胞增殖、迁移、侵袭增强的情况。此外构建LncRNA DANCR的干扰载体,转染TCa-8113、CAL-27两组细胞系,进一步筛选稳转细胞系。在裸鼠右侧腋窝处将稳定转染的舌癌细胞（DANCR shRNA组）和对照组（NC shRNA组）进行皮下注射,当明显可观察到瘤体组织后定期测量,25天后取瘤体称重。Western blot检测各组瘤体组织中MMP-2、MMP-9、KLF8的表达情况。免疫荧光染色检测KLF8在瘤体组织中的表达情况。结果:1.LncRNA DANCR参与调控TSCC的增殖、转移和侵袭,且敲低TCa-8113、CAL-27细胞中的LncRNA DANCR后,TSCC细胞增殖、转移和侵袭能力显著减弱,反之在SCC9、TSCCA细胞系中过表达LncRNA DANCR后,TSCC细胞增殖、转移和侵袭能力显著增强。2.miR-135a-5p与DANCR能靶向结合。miR-135a-5p表达受DANCR负向调控,而KLF8表达受DANCR正向调控。抑制miR-135a-5p可激活TSCC细胞系中的KLF8,而加剧肿瘤细胞的进展。miR-135a-5p抑制剂可显著增强TSCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,且miR-135a-5p抑制剂可以部分逆转DANCR敲低导致的细胞增殖抑制、迁移能力减弱以及侵袭能力减弱的情况;转染KLF8 siRNA可以部分逆转因抑制miR-135a-5p而导致的肿瘤细胞恶性程度加剧的情况。3.体内实验表明,DANCR基因敲除后肿瘤尺寸和重量显著降低,肿瘤生长速率减缓,瘤内侵袭和转移的效用蛋白KLF8以及MMP-2/9的表达量显著下降,肿瘤恶性程度降低。结论:1.DANCR参与调控TSCC细胞的增殖、转移和侵袭。2.DANCR通过靶向miR-135a-5p/KLF8轴在TSCC进展中发挥致癌作用。3.体内实验表明,下调DANCR可降低TSCC肿瘤生长,抑制细胞迁移和侵袭相关的效用蛋白。