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目的:
通过体外培养哺乳期乳腺细胞,观察不同碘营养水平时哺乳期乳腺细胞钠碘转运体(NIS)表达的变化,及胰岛素样生长因子I(IGF—I)、转化生长因子β1 (TGF-βl)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-a)对不同碘营养水平下哺乳期乳腺细胞钠碘转运体(NIS)表达的影响。
方法:
培养小鼠原代哺乳期乳腺细胞,分为低碘1组、低碘2组、适碘组、高碘1组、高碘2组,研究NIS表达的变化:再分别加入IGF-I、TGF-β1、IFN-γ、TNF-α,比较不同因素对哺乳期乳腺细胞NIS表达的影响。用实时荧光定量PCR方法检测哺乳期乳腺细胞NIS mRNA表达,并用Western blot方法检测蛋白表达。
结果:
1、低碘1组的乳腺细胞NIS mRNA表达水平高于适碘组(P<0.01),高碘1、2组低于适碘组(P<0.05)。随着碘浓度升高,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈下降趋势。
2、碘加IGF—I各组的乳腺细胞NIS mRNA表达水平均低于单纯加碘各组(P<0.01)。加入IGF—I后,低碘1组高于适碘组(P<0.01);随着碘浓度升高,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈下降趋势。
3、碘加TGF—β1的低碘1组、高碘2组的乳腺细胞NIS mRNA表达水平均低于单纯加碘各组(P<0.01)。加入TGF—β1后,低碘1组、高碘1组、高碘2组均低于适碘组(P<0.05);随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS mRNA表达水平均呈下降趋势。
4、碘加IFN—γ各组的乳腺细胞NIS mRNA表达水平均低于单纯加碘各组(P<0.01)。加入IFN—γ后,低碘1、2组、高碘1、2组均低于适碘组(P<0.01);随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS mRNA表达水平均呈下降趋势。
5、碘加TNF—α的低碘1组、低碘2组、适碘组的乳腺细胞NIS mRNA表达水平均低于单纯加碘各组(P<0.01)。加入TNF—α后,高碘1、2组高于适碘组(P<0.01):随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈上升趋势。
6、随着碘浓度升高,乳腺细胞NIS蛋白表达水平呈下降趋势。
7、碘加IGF-I各组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平均有低于单纯加碘的各组的趋势。加入IGF-I后,随着碘浓度升高,乳腺细胞NIS蛋白表达水平呈下降趋势。
8、碘加TGF—β1的低碘l组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平低于单纯加碘组(P<0.01)。加入TGF—βl后,低碘1组、高碘2组低于适碘组(P<0.05);随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS蛋白表达水平均呈下降趋势。
9、碘加IFN—γ的低碘1组、低碘2组和高碘1组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平均低于单纯加碘的各组(P<0.05)。加入IFN—γ后,低碘l、2组低于适碘组(P<0.05);随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS蛋白表达水平均呈下降趋势。
10、碘加TNF—α各组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平均有低于单纯加碘各组的趋势。加入TNF—α后,随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS蛋白表达水平均呈上升趋势。
结论:
1、从不同碘营养水平时哺乳期乳腺细胞摄碘能力影响的研究结果来看,母体存在减轻子代碘缺乏或碘过量的保护机制。在缺碘条件下,母体提高乳腺摄碘能力,减轻碘缺乏对子代造成的危害;在高碘条件下,母体降低乳腺摄碘能力,减轻碘过量对子代造成的危害。
2、IGF—I、TGF—β1、IFN—γ、TNF—α对不同碘营养水平下哺乳期乳腺细胞NIS mRNA和蛋白表达具有抑制作用。TGF—βl对重度低碘及重度高碘的抑制程度更强;IFN—γ对重度低碘及轻度低碘的抑制程度更强。