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目的：多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是终末期B细胞克隆性增殖性恶性血液病疾病，在我国的发病率约为1/100000，但随着人口老龄化的增加, MM的发病率也有逐年增高的趋势。尽管近年来大剂量化疗以及新药沙利度胺、雷那度胺及硼替佐米的应用在临床治疗中已取得了较好的疗效,但多发性骨髓瘤仍然存在耐药及复发,因此还需要进一步研发新的药物。唑来膦酸是第三代二磷酸盐药物，已在国内外应用于MM骨病治疗及预防，有研究发现，唑来膦酸能够通过抑制骨髓瘤细胞中焦磷酸法尼酯合成酶，进而阻止小G蛋白异戊烯化引而起骨髓瘤细胞凋亡。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）通过抑制组蛋白去乙酰化酶（HDAC）的活性，诱导靶细胞中组蛋白高度乙酰化，启动某些特异性基因的表达，从而阻断肿瘤细胞的生长。LBH-589是氧肟酸盐类HDACi，在实体瘤和血液系统肿瘤的临床前试验中均显示了抗肿瘤活性，包括强效的抗骨髓瘤活性。信号转导单元CD130（gp130）是IL-6受体复合物最重要的部分，IL-6在MM细胞生长以及存活中扮演着重要角色，下调CD130的表达能够影响对MM细胞生长促进作用。本实验探索了唑来膦酸联合LBH589对人骨髓瘤细胞株KM3细胞的协同抗肿瘤作用及对表面标志CD130的影响，为今后这两种药物联合应用于临床试验提供了理论基础和证据。方法：1细胞培养人多发性骨髓瘤细胞株KM3细胞，用含10%灭活胎牛血清，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素的RPMI1640培养液，置于37℃，50mL/L CO2的培养箱中培养。实验时细胞处于对数生长期，台盼蓝染色拒染率95%以上。2细胞活性测定采用MTT法检测不同浓度（0.01、0.05、0.1、0.5、1μmol/L）的唑来膦酸、不同浓度（5、10、15、20nmol/L）的LBH589及不同浓度两药两两联合，在不同时间（24h、48h、72h）对KM3细胞增殖的影响。3细胞凋亡检测不同浓度（0.01、0.05、0.1μmol/L）唑来膦酸、LBH589（5nmol/L、10nmol/L）及两药两两联合处理KM3细胞48h后，应用流式细胞仪测定细胞凋亡率。4细胞周期检测：上述浓度的唑来膦酸、LBH589及两药联合处理KM3细胞48h后，应用流式细胞仪测定细胞周期。5CD130表达水平检测：上述浓度的唑来膦酸、LBH589及两药联合处理KM3细胞48h后，应用流式细胞仪进行表面标志检测。结果：1MTT检测KM3细胞增殖抑制：KM3细胞经分别经0.01、0.05、0.1、0.5、1μmol/L浓度的唑来膦酸单药，5、10、15、20nmol/L不同浓度的LBH589单药及以上各浓度的唑来膦酸及以上各浓度的LBH589两两联合处理24h、48h、72h后，各组细胞抑制率不同程度增大，且随着药物浓度增加及作用时间延长，抑制率逐渐增大，差异有显著性（P＜0.05）。将同一处理组不同时间两两比较，差异有统计学意义（P＜0.05），同一时间不同浓度处理组两两比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结果表明，唑来膦酸及LBH589可以抑制KM3细胞的生长，作用均呈剂量依赖性及时间依赖性。唑来膦酸与LBH589各浓度两两联合用药和单药组比较（48h）的CI值在0.535-1.180之间，而在两药浓度相对较小时的CI均小于0.9，表明两药对KM3细胞有协同抑制作用，协同作用最强组为唑来膦酸0.1μmol/L联合LBH5895nmol/L。2流式细胞术检测KM3细胞凋亡：依据MTT结果调整唑来膦酸与LBH589的处理浓度及时间，唑来膦酸0.01、0.05、0.1μmol/L，LBH5895、10nmol/L及两种药物上述浓度两两联合处理KM3细胞48h，单药组及联合用药组均在G0/G1峰前出现了亚二倍体细胞峰，表明各组均出现了凋亡，唑来膦酸联合LBH589与两药单独应用相比增加了KM3细胞凋亡，差异有统计学意义（P＜0.05）。3流式细胞术检测KM3细胞周期：KM3细胞经过上述不同浓度的唑来膦酸、LBH589及两药联合作用48h后，（1）唑来膦酸单药组，随着唑来膦酸作用浓度增加，S期细胞比例升高，G0/G1期细胞比例降低，其中0.05μmol/L和0.1μmol/L组与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05），而G2/M期细胞比例变化不明显，（2）LBH589单药组，随着LBH589作用浓度增加，G0/G1期细胞比例升高，S期细胞比例降低，与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05），G2/M期细胞比例变化不明显，（3）联合用药组，随着两药作用浓度增加，G2/M期细胞比例降低，其中唑来膦酸0.05、0.1μmol/L和LBH5895、10nmol/L两两联合组与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05），G0/G1期、S期没有差异。4流式细胞术检测KM3细胞CD130表达：（1）唑来膦酸单药组，随着唑来膦酸作用浓度增加，KM3细胞CD130阳性细胞数逐渐减少，细胞表面CD130平均荧光强度也逐渐减弱，唑来膦酸0.05和0.1μmol/L组与对照组相比，差异有统计学意义(P＜0.05),（2）LBH589单药组，随着LBH589作用浓度增加，KM3细胞CD130阳性细胞数逐渐减少，细胞表面CD130平均荧光强度也逐渐减弱，与对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）,（3）联合用药组与对照组相比，随着两药浓度增加，CD130阳性细胞数明显减少，其细胞表面CD130平均荧光强度也明显减弱，加药组与对照组相比，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：1在一定的浓度范围内，唑来膦酸及LBH589均可以抑制人骨髓瘤细胞株KM3细胞的增殖，其效应呈时间依赖性及剂量依赖性，并且二者联用具有协同作用。2唑来膦酸及LBH589均可诱导KM3细胞凋亡。唑来膦酸可使KM3细胞阻滞于S期，而LBH589可使KM3细胞阻滞于G0/G1期，干扰肿瘤细胞周期可能为两药抗骨髓瘤的作用机制之一。3唑来膦酸和LBH589均引起CD130阳性细胞数的减少及细胞表面CD130平均荧光强度的减弱，下调KM3细胞表面CD130的表达可能为两药抗骨髓瘤的作用机制之一。