含细菌群体感应淬灭酶的菌种筛选和鉴定

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细菌的群体感应系统(Quorum sensing,QS)参与许多生物学功能的调控,其中包括动植物病原细菌致病因子的产生以及人类某些病原细菌生物膜的形成。酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactone,AHL)是调控群体感应系统的关键信号分子。近年的研究证明,不同生物体包括细菌和真核生物中都存在类别不同的酰基高丝氨酸内酯降解酶。在AHL依赖型致病菌和转基因植物中AHL降解酶能有效地抑制QS信号分子的积累,从而阻断病原细菌的发病机制,提高了植物的抗病性。这些新颖的群体感应淬灭酶的发现,不仅为防治细菌侵染提供了可行的途径,也对研究它们在宿主中的作用和对生态系统的潜在影响提出挑战。本实验利用酰基高丝氨酸内酯为菌株生长的唯一的碳源和能源,筛选得到两株能够降解AHL的菌株X1和R1。对其进行生理生化鉴定和16SrDNA、18SrDNA分子水平鉴定,菌株X1为细菌,属于黄单胞菌属;菌株R1为酵母菌,属于红冬孢酵母菌属,菌株R1构建的系统发育树显示菌株R1与Rhodosporidium toruloides聚为一群,相似性高达99.9%。并研究了两菌株的最适生长条件及其对不同AHL的降解特性,最适生长温度为28-30℃,最适pH值为7.5左右。对两株菌利用不同碳源的情况进行研究显示,随着不同碳源酰基侧链碳原子个数的增长,菌株X1和R1在相同的培养时间总菌体数都呈线性增加。它们的粗酶液也都具有很强的AHL降解能力,且菌株R1的能力要优于菌株X1。菌株对欧文氏胡萝卜软腐致病菌的拮抗研究表明,无论是菌株X1和R1的菌液本身还是菌株的粗酶液,对致病菌都具有拮抗作用,都能比较明显的抑制软腐病病害。
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学位
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