苹果内生细菌的分离及其对苹果斑点落叶病的生物防治研究

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苹果斑点落叶病(Alternaria alternata f. sp. mali)已经成为我国苹果生产上的重要病害,在我国大部分苹果产区均有发生,严重影响苹果产量和品质。本研究通过分离、筛选对苹果斑点落叶病具有拮抗作用的菌株,并且对拮抗菌株的特性进行研究。主要结果如下:从苹果树的不同部位分离获得内生细菌118株,在苹果不同生长季节以及不同部位分离获得的内生细菌数量不同。叶片中内生细菌数最多,达到4.95×102 cfu/g,树皮中的内生细菌数量居中,为4.4×10~2cfu/g,茎中存在的细菌数最少,为1.83×10~2 cfu/g。从叶片上分离到的细菌种数占所分离内生细菌总种类的75%。通过平板对峙培养和发酵液抑菌活性测定,在所分离的118个菌株中,筛选出7株对苹果斑点落叶病菌具有较强拮抗作用的菌株,其中菌株B86和B91的发酵滤液在活体上对苹果斑点落叶病的防治效果显著,其防效分别为73.72%和75.32%。B86和B91两菌株培养滤液对斑点落叶病菌的分生孢子萌发具有较强抑制作用,用培养滤液原液处理的分生孢子萌发率最低,分别为8.7%和6.7%,并造成芽管畸形膨大,呈泡囊状,泡囊逐渐消解破裂,分生孢子萌发受到完全抑制。两菌株对14种病原真菌菌丝生长均具有较好的拮抗作用,表明两菌株具有较广的抗菌谱。两菌株培养滤液抑菌活性在50℃至90℃范围内具有热稳定性。两菌株培养滤液在pH6.0-7.0时抑菌活性最高,pH5.0-9.0范围内其抑菌物质具有酸碱稳定性。随着酸、碱性不断增加,抑菌活性逐渐下降。两菌株最适生长条件测定表明,菌株B86和B91培养生长的最适初始pH值分别为pH6.0和pH7.0;菌株B86和B91的最适生长温度分别为28℃和30℃。
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