Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2调控骨肉瘤细胞的侵袭及迁移作用研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yakataxxxx
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背景与目的:Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil forming protein kinase2,ROCK2)与肿瘤的恶性进展紧密相关,肿瘤的侵袭及迁移是导致其治疗失效的主要原因,本研究分析骨肉瘤组织中ROCK2的表达及探讨其对骨肉瘤细胞侵袭及迁移的影响及机制。方法:1、实时荧光定量PCR、Western blot及免疫组织化学染色法检测骨肉瘤组织中ROCK2的表达情况;2、沉默骨肉瘤细胞中ROCK2的表达,采用划痕愈合及Transwell实验分析骨肉瘤细胞的侵袭及迁移能力,3、检测骨肉瘤细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达,并在下调ROCK2的骨肉瘤细胞中加入EMT诱导剂TGF-β,检测其侵袭及迁移的变化。4、通过尾静脉转移实验检测降低ROCK2表达对体内转移的影响。结果:1、ROCK2在骨肉瘤组织中的表达显著高于其相应的癌旁组织(P<0.05)2、下调骨肉瘤细胞中ROCK2的表达后,其体内外侵袭及迁移能力明显被抑制(P<0.05);3、EMT相关蛋白E-cadherin表达下降,而N-cadherin及Vimentin蛋白明显增加;诱导骨肉瘤细胞中EMT发生后能够减弱下调ROCK2对骨肉瘤细胞侵袭及迁移的抑制作用。4、下调骨肉瘤细胞中ROCK2的表达后,体内转移的发生明显减低结论:ROCK2在骨肉瘤组织中表达提升,其通过诱导骨肉瘤细胞EMT的发生进而促进其侵袭及迁移,ROCK2可能是骨肉瘤靶向治疗的潜在生物标志物。
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