目的:　　口腔鳞状细胞癌是口腔颌面部最为常见的恶性肿瘤之一，每年有超过28万新增的病例。中国是口腔鳞癌的高发地区，近年来的发病呈上升趋势。虽然目前已有新型的化疗方法和靶向治疗药物应用于临床，但其效果不甚理想，因此我们需深入了解口腔鳞癌的发生发展机制。Hippo信号通路下游的关键效应分子YAP已被报道在肝癌、肺癌等肿瘤组织中表达异常。因此，本课题旨在探讨YAP对口腔鳞癌细胞CAL27的增殖和凋亡的影响，并研究其在体内体外促肿瘤的作用和机制，为YAP基因作为口腔鳞癌治疗新的靶点提供理论依据。　　方法:　　1.用免疫组化法检测不同分化程度的口腔鳞癌和正常口腔上皮组织中YAP蛋白的表达情况。　　2.检测YAP在4株口腔鳞状细胞癌细胞系中的表达水平，并选择CAL27作为进一步的实验材料。利用慢病毒载体转染CAL27细胞，分别构建敲除和过表达YAP基因及对照组的口腔鳞癌细胞系。通过QRT-PCR及Westem blot检测敲除和过表达效率。　　3.利用CCK-8细胞活力实验，EdU染色法，克隆形成实验来检测敲除和过表达YAP对CAL27细胞增殖的影响;流式细胞术检测YAP对细胞周期和细胞凋亡的影响。通过QRT-PCR及Western blot技术检测C-MYC、BCL-2等周期和凋亡相关因子随YAP表达改变时的情况。　　4.以不同浓度的Hippo-YAP信号通路抑制剂维替泊芬处理CAL27细胞，利用CCK-8细胞活力实验、流式细胞术来检测细胞增殖、凋亡和周期的改变;利用QRT-PCR及Western blot技术检测C-MYC和BCL-2等因子随抑制剂浓度改变情况。　　5.利用裸鼠成瘤实验，将敲除组、过表达组及相应对照组CAL27细胞注入到裸鼠皮下，观察肿瘤生长情况，分析YAP的不同表达水平对口腔鳞癌发生发展的影响。　　结果:　　1.YAP蛋白在正常口腔上皮组织中基本不表达，或表达较弱;口腔鳞状细胞癌中，YAP蛋白的表达水平较高，与肿瘤分化程度有关。　　2.在CAL27细胞中，YAP基因和蛋白表达水平适中。在敲除YAP基因后，YAP及其下游靶基因CTGF、ANKRD、CYR61表达水平明显降低，同时细胞中总YAP和细胞核中YAP表达水平均降低。过表达YAP基因后，YAP及其下游靶基因CTGF、ANKRD、CYR61表达水平明显升高，而细胞中总YAP和胞核中YAP表达水平均升高。　　3.与对照组相比，敲除YAP基因后，CAL27细胞增殖较慢，细胞周期阻滞，同时早期凋亡和晚期凋亡细胞比例均升高;C-MYC和BCL-2mRNA及蛋白表达水平均降低;周期相关蛋白CyclinD1表达水平下降，促凋亡蛋白BAX、Caspase7表达水平升高。过表达YAP基因后，CAL27细胞增殖加快，细胞周期进展加速，早、晚期凋亡细胞比例均降低;C-MYC和BCL-2表达水平升高;CyclinD1蛋白表达水平升高，BAX、Caspase7蛋白表达水平下降。　　4.以不同浓度的Hippo-YAP信号通路抑制剂维替泊芬处理CAL27细胞。利用CCK-8细胞活力实验检测细胞增殖情况，利用流式细胞术来检测细胞周期和凋亡的改变;利用QRT-PCR及Western blot技术检测C-MYC和BCL-2等因子随抑制剂浓度改变情况。　　5.敲除YAP基因后，CAL27细胞在裸鼠体内形成肿瘤速度较慢，肿瘤体积较小，且肿瘤重量较轻;而过表达YAP基因后，肿瘤形成速度较快，肿瘤体积较大，同时肿瘤重量较重。　　结论:　　YAP在口腔鳞癌中高表达且与肿瘤的分级相关;YAP能通过调节C-MYC和BCL-2的表达，来影响细胞的增殖和凋亡，从而调控肿瘤的进展。提示YAP在口腔鳞状细胞癌的发生发展中具有重要意义，为口腔鳞癌的分子靶向治疗提供了新思路。