建鲤IGFBP1、IGFBP3基因多态性对增重的影响

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动物的生长主要由生长激素(growth hormone, GH)-胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor, IGF)生长内分泌轴调控。胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor binding proteins, IGFBPs)是IGF的主要结合蛋白,可调节血液中IGF的生物利用度,是调节动物生长的重要因子之一。本研究分离了建鲤(Cyprinus carpio var. jian) IGFBP1的DNA序列和IGFBP3的外显子及靠近外显子部分的内含子序列。在IGFBPl-和IGFBP3上分别找到31个和36个SNPs位点,其中IGFBP1a基因上7个,IGFBP1b基因上24个,IGFBP3a基因上18个,IGFBP3b基因上18个。使用PCR-RFLP检测了其中7个位点(IGFBP1b-E1_A210G, IGFBP1b-E3_C108T、IGFBP3a-I3_G-253T、IGFBP3b-12_G30T IGFBP3b-I3_A-341G、IGFBP3b-E4_C54T、IGFBP3b-E4_C72G)在931尾(♂485,♀446)建鲤中的基因型分布。不同基因型与雌、雄建鲤增重的相关性分析结果显示:与雌鱼鱼种增重极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)相关的位点为A210G、G-253T、G30T、A-341G、C54T和C72G,增重快的基因型依次为AG型、TT型、GG型、AG型、CC型和CG型。与雄鱼鱼种增重极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)相关的位点为A210G、C108T、G30T,依次为GG型、CC型、GG型个体增重最快。与雌、雄成鱼增重均相关的位点为C108T、C72G、A-341T,其中C108T的CC型、CT型增重极显著(P<0.01)快于TT型个体,C72G的CG型增重显著(P<0.05)快于CC型和GG型个体,A-341G的AG型个体增重显著(P<0.05)较AA型快,表现出杂合型位点的个体增长快,验证了杂种优势理论。与雄性成鱼增重相关的位点还有A210G、G-253T,其A210G的AG型增重极显著(P<0.01)快于AA型个体,在雌鱼中也是AG型增重最快,但差异不显著;G-253T的GT型增重极显著(P<0.01)快于GG和TT型个体,但在雌鱼中没有这种趋势。与雌性成鱼增重相关的位点还有G30T,其GG型和GT型增重显著(P<0.05),快于TT型个体,在雄性成鱼中也是GG型个体生长较快,但差异不显著。对IGFBP1上的位点构建双倍型,并分析其与增重的相关性,结果表明双倍型D4、D5、D7增重显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于D2、D6、D9型。对IGFBP3上的位点分析标记富集个数与增重的相关性,结果表明随富集标记个数的增多,增重也随之增大,这与数量性状特性相符。A210G的AG型、C108T的CC型、G30T的GG型、A-341G的AG型和C72G的CG型可作为建鲤生长快的分子标记,用于今后分子育种。实时定量RT-PCR结果显示,IGFBP、IGFBP3在雌雄鱼肝脏中表达量最高,在不同组织中表达量有差异,表现出一定的组织特异性和发育阶段特异性。
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