目的优化天浆壳蛋白的提取工艺,对经分离纯化的蛋白进行抗氧化活性研究。方法采用碱提酸沉法提取天浆壳蛋白,以蛋白提取率为衡量标准。通过单因素实验,选定对蛋白提取率有较大影响的四个因素（料液比、提取液p H、浸提温度、提取时间）的适宜范围,在单因素实验结果的基础上,进行正交实验,最终确定蛋白提取率最高时的提取条件。应用DEAE-52离子交换柱、Sephadex G-75凝胶柱及透析对粗提蛋白进行分离纯化,并通过SDS-PAGE分析天浆壳蛋白电泳图谱。通过纯化后的蛋白对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH·）、羟自由基（·OH）的清除率实验和还原能力实验考察天浆壳蛋白的抗氧化活性。测定肝癌细胞中超氧化物歧化酶（SOD）的活力,并采用MTT实验研究天浆壳蛋白对肝癌细胞增殖的影响。结果天浆壳蛋白最优提取工艺为提取时间1.0 h、提取液pH 11.5、料液比1∶20（g/mL）、浸提温度60℃。验证实验表明,平均提取率为89.18%。粗蛋白经DEAE-52离子交换柱进行初步纯化后,图谱显示有两个组分峰,分别为MJNP1和MJNP2。MJNP1经Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,得到纯度较高的天浆壳蛋白MJNP-A。通过分析SDS-PAGE的结果,经DEAE-52离子交换柱和Sephadex G-75凝胶柱纯化后的天浆壳蛋白成分单一,其分子量约为45 kDa。纯化后的天浆壳蛋白对DPPH·、·OH的清除率分别为52.45%（800μg/m L）、31.57%（800μg/mL）,且清除DPPH·、·OH的半抑制浓度(IC₅₀)分别为644.84μg/mL、1392.03μg/mL,并具有还原能力。SOD实验表明肝癌细胞内SOD活力增强。MTT实验显示,天浆壳蛋白具有抑制肝癌细胞增殖的作用,并具有一定量-效关系。结论单因素实验和正交实验优化的提取工艺使天浆壳蛋白的提取率增高。DEAE-52离子交换柱和Sephadex G-75凝胶柱对粗蛋白进行了有效的纯化。细胞实验表明,天浆壳蛋白具有抑制肝癌细胞增殖的作用。