【摘 要】
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目的:为探讨P基因与肺癌发生、发展的关系,我们在54例原发肺癌组织石 蜡标本中研究P基因存在状态,分析P基因失活的多种机制以及P基因与 抑癌基因P、RB之间的相互关系.方法:合
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目的:为探讨P<16>基因与肺癌发生、发展的关系,我们在54例原发肺癌组织石 蜡标本中研究P<16>基因存在状态,分析P<16>基因失活的多种机制以及P<16>基因与 抑癌基因P<53>、RB之间的相互关系.方法:合成P<16>基因第2外显子上游区和下游区两对引物以及P<53>基因第5、6、7、8外显子四对引物,采用银染PCR-SSC P技术分析抑癌基因P<16>、P<53>在肺癌组织中基因突变状况.P<16>-Blues cript M13-重组质粒转染大肠杆菌DH5α后,进行筛选、扩增、抽提和酶切.用随机引物法制备地高辛标记的P<16>cDNA质粒探针,随后建立Southern杂 交技术,并同时采用双重PCR方法.分析肺癌组织中P<16>基因纯合性缺失情况.运用 免疫组化方法(链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物免疫组化技术,SABC法)检测肺癌组织中P<16>基因与RB基因的相互关系.结论:该文首次发现P<16>基因失活和P<53>基因突变对NSCLC的肿瘤细胞分化及淋巴转移有协同作用.二者联合检测能够更 加有效地预测肺癌的生物学行为,评估患者预后.该实验结果支持抑癌基因P<16>和抑癌 基因RB在共同途径上调控细胞周期的假说.认为实施P<16>基因为靶向的基因治疗必须 在RB基因正常的肿瘤中进行,才有可能达到预期效果.NSCLC将是比SCLC更为理想的P<16>基因治疗对象.
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