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本研究采用高效液相色谱法(HPLC)对茄尼醇含量进行测定,结果茄尼醇浓度线性范围为10~200μg/mL(r=0.9999),茄尼醇的加样回收率为98.67%,RSD为1.15%。并以此方法测定了12种不同品种等级烟叶中茄尼醇的含量。
以茄尼醇提取率和浸膏中茄尼醇的含量为指标,考察了烟叶中茄尼醇超临界CO2萃取工艺,分别考察了物料预处理方法、夹带剂种类、夹带剂用量、萃取时间、萃取压力、萃取温度、二氧化碳流量等因素对茄尼醇萃取结果的影响,并且以萃取压力、萃取温度、萃取时间为主要影响因素进行了正交优化实验。根据实验结果确定,物料预处理方法为:粉碎的烟叶粗粉加水浸泡2h,过滤,40℃下烘干,过20目筛整粒。烟叶中茄尼醇的超临界CO2萃取工艺为:以95%7,醇作为夹带剂,用量1:1(w/v),在萃取压力20MPa,温度45℃,分离压力5MPa,温度35℃,CO2流量4.8L/h,萃取3h,茄尼醇的提取率为94.0%,提取物中茄尼醇的含量为33.0%。
烟叶中茄尼醇超临界CO2萃取工艺和溶剂提取工艺相比,避免了溶剂消耗过大,环境污染、操作复杂等问题,并且提取率和浸膏浓度都较高,简化了后续的纯化工艺。
以柱层析和结晶法纯化超临界萃取产物中的茄尼醇,用硅胶柱,洗脱剂为石油醚、乙酸乙酯(15:1),分段收集洗脱液,薄层色谱对各洗脱馏分进行跟踪检测(薄层条件:石油醚-乙酸乙酯4:1,碘蒸汽显色),归并富含茄尼醇馏分,减压回收溶剂,得橙黄色浆状茄尼醇,经高效液相分析,含量为70%。将上述实验所得茄尼醇用丙酮溶解,0℃冷却保持12h,得白色针状结晶,经高效液相分析,含量为93.4%,总收率为70%。
以茄尼醇提取率和浸膏中茄尼醇的含量为指标,考察了烟叶中茄尼醇超临界CO2萃取工艺,分别考察了物料预处理方法、夹带剂种类、夹带剂用量、萃取时间、萃取压力、萃取温度、二氧化碳流量等因素对茄尼醇萃取结果的影响,并且以萃取压力、萃取温度、萃取时间为主要影响因素进行了正交优化实验。根据实验结果确定,物料预处理方法为:粉碎的烟叶粗粉加水浸泡2h,过滤,40℃下烘干,过20目筛整粒。烟叶中茄尼醇的超临界CO2萃取工艺为:以95%7,醇作为夹带剂,用量1:1(w/v),在萃取压力20MPa,温度45℃,分离压力5MPa,温度35℃,CO2流量4.8L/h,萃取3h,茄尼醇的提取率为94.0%,提取物中茄尼醇的含量为33.0%。
烟叶中茄尼醇超临界CO2萃取工艺和溶剂提取工艺相比,避免了溶剂消耗过大,环境污染、操作复杂等问题,并且提取率和浸膏浓度都较高,简化了后续的纯化工艺。
以柱层析和结晶法纯化超临界萃取产物中的茄尼醇,用硅胶柱,洗脱剂为石油醚、乙酸乙酯(15:1),分段收集洗脱液,薄层色谱对各洗脱馏分进行跟踪检测(薄层条件:石油醚-乙酸乙酯4:1,碘蒸汽显色),归并富含茄尼醇馏分,减压回收溶剂,得橙黄色浆状茄尼醇,经高效液相分析,含量为70%。将上述实验所得茄尼醇用丙酮溶解,0℃冷却保持12h,得白色针状结晶,经高效液相分析,含量为93.4%,总收率为70%。