甲状旁腺激素对兔下颌骨髁突高位骨折游离复位后软骨愈合的影响

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目的:探讨甲状旁腺激素(Parathyroid hormone,PTH)在兔髁突高位骨折游离复位后对髁突软骨愈合的影响。方法:将48只新西兰大耳兔建立髁突高位骨折游离复位固定实验模型,随机分为实验组及对照组,每组24只。术后实验组隔日颈部皮下注射PTH 20mg/Kg,对照组颈部皮下注射等体积的生理盐水。分别在术后1周,2周,3周,4周时处死,取手术侧下颌骨髁突标本行大体形态学研究;苏木素-伊红(hematoxylin and eosin staining,HE)染色和番红O-固绿染色检测髁突软骨骨折区组织结构变化,周围基质降解情况;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测髁突软骨骨折区新生软骨组织中Sox9(SRY-related high mobility group-box gene-9)和基质金属蛋白酶13(matrix metallopeptidase 13,MMP-13)的表达;实时荧光定量PCR(real-time PCR,q PCR)检测髁突软骨中Sox9和基质金属蛋白酶13、Ⅱ型胶原蛋白(Collagen typeⅡ,Col2al)和X型胶原蛋白(Collagen type X,ColⅩ)的m RNA的表达。结果:HE染色及番红O-固绿染色结果提示在对照组中软骨骨折区基质降解较实验组严重,软骨下方的炎症细胞浸润较实验组明显,软骨骨折区的软骨细胞数量及软骨基质沉积都较实验组少,且对照组中软骨骨折区见纤维样组织充填。免疫组化检测显示各时期的实验组Sox9的染色强度均强于对照组,提示实验组中Sox9的表达量高于对照组,且在术后1周、2周、3周时差异具有统计学意义(P<0.05);各时期实验组中MMP-13染色强度较对照组弱,提示实验组中MMP-13的表达量低于对照组,在术后1周、2周、3周时的差异具有统计学意义(p<0.05)。各时期实验组中Sox9 m RNA的相对表达量均高于对照组,且术后1周、2周、3周时差异具有统计学意义(P<0.05);实验组中MMP-13 m RNA的相对表达量低于对照组,且差异在术后1周、2周、3周时具有统计学意义(p<0.05);各时期实验组中Col2al m RNA的相对表达量较对照组高,在术后2周、3周、4周时两组间的表达差异具有统计学意义(p<0.05);各时期实验组中ColⅩm RNA的相对表达量较对照组低,两组间的表达差异在术后2周、3周、4周时具有统计学意义(p<0.05)。术后4周时实验组及对照组中Sox9、MMP-13的染色强度及m RNA相对表达量差异无统计学意义;术后1周时,对照组及实验组中Col2al、ColⅩ的染色强度和m RNA的相对表达量差异也无统计学意义。结论:间歇性皮下注射PTH后,可能通过上调Sox9和Col2al的表达,抑制早期MMP-13和ColⅩ的表达,加快髁突骨折后软骨损伤修复。
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