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目的:通过同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）干预孕鼠,建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型,探讨Hcy与先天性心脏病（congenitalheart defect,CHD）PAX-8基因表达的关系及叶酸（Folic Acid,FA）、VitB12对Hcy的干预作用,从心脏发育的分子学角度探讨CHD发生的病因。方法:40只S-D孕鼠随机分为四组:高剂量Hcy建模组（A组）、低剂量Hcy建模组（B组）、高剂量Hcy+(FA+VitB12)干预组（C组）及对照组（D组）,每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的Hcy:A组2%Hcy 2mg/10g/d、B组1%Hcy1mg/10g/d、C组2%Hcy 2mg/10g/d、D组注射生理盐水0.1ml/10g/d,C组自确定妊娠起,按FA 0.05mg/10g/d+VitB12 1mg/10g╱d给药,至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠,待其自然分娩当日,体视显微镜下解剖仔鼠,观察仔鼠心脏畸形情况。选取A、B、C三组内VSD仔鼠心脏各5例,非CHD仔鼠心脏各15例,D组非CHD仔鼠心脏15例,提取RNA,应用real time PCR检测PAX-8 mRNA在仔鼠心脏的表达情况;同时选取A、B、C三组VSD仔鼠心脏各2例、非CHD仔鼠心脏各5例、D组非CHD仔鼠心脏5例,5%甲醛固定,石蜡包埋,应用免疫组化检测PAX-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。结果:1、A、B、C、D四组平均产仔数分别为:9.04只、12.1只、11.56只及13.56只,A、B、C三组平均产仔数分别与D组比较,p值均＜0.01;A、B、C三组平均产仔数之间两两比较,p值均＜0.01,提示外源性Hcy可导致孕鼠产仔数减少,通过对孕鼠用FA+Vit B12干预,可增加孕鼠产仔数。2、A、B、C、D四组仔鼠心脏畸形率分别为:13.5%、9.17%、8.77%及0.74%,A、B、C三组之间两两比较,p值均＞0.05;A、B、C三组分别与D组比较,p值均＜0.01,提示外源性Hcy可引起仔鼠心脏畸形。3、PAX-8 mRNA在A、B、C、D四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较:PAX-8 mRNA在VSD仔鼠心脏细胞中的表达均低于非CHD仔鼠,p值均＜0.01。A、B、C三组VSD仔鼠心脏细胞中的PAX-8mRNA表达比较:B组＞A组,A组＞C组,p值均＜0.01,B组与C组比较p＞0.05。A、B、C、D四组非CHD仔鼠心脏组织中的PAX-8mRNA表达比较,p值均＞0.05。VSD仔鼠心肌组织PAX-8 mRNA表达水平与孕鼠Hcy注射剂量呈负相关,r=-0.949,p＜0.01。4、PAX-8蛋白在A、B、C、D四组组内及组间VSD仔鼠心脏细胞中表达均低于非CHD仔鼠,p值均＜0.01。PAX-8蛋白在A、B、C三组VSD仔鼠之间心脏中的表达比较无差异,p值均＞0.05。四组非CHD仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异,p值均＞0.05。结论:1、PAX-8mRNA在VSD胎鼠心肌中的呈低表达,且与Hcy剂量呈负相关,PAX-8基因的低表达可能与VSD的形成有关。2、高水平的Hcy具有胚胎毒性,孕期FA与VitB12干预可增加平均胎产数,降低Hcy的胚胎毒性。