背景：随着医疗水平的不断提高,自身免疫性肝炎诊断率逐年上升。自身免疫性肝炎(AIH)是由于肝脏自身的免疫耐受性减退,不能识别自身肝组织成分而发生自身免疫反应,从而引起的一种非自限性肝炎,其发病方式以缓慢发病为主。AIH的发病机制到目前为止尚不清楚,最新观点认为,机体受环境、药物或感染因子等诱导,在易感基因的作用下,产生肝细胞膜自身靶抗原,使机体免疫功能失调,以及肝脏本身免疫耐受性减退,通过细胞免疫与体液免疫反应,导致自身免疫性肝损伤。以血清转氨酶升高、高了一球蛋白血症、自身抗体阳性、肝组织学特征性改变(界面性肝炎、汇管区淋巴浆细胞浸润)以及对免疫抑制治疗应答为特点。本病以中老年女性发病者多见,而临床上所见的年轻女性患者病情一般较重,就诊时肝硬化的发生率较高。约50%的AIH患者起病隐匿,约30%的患者确诊时已出现肝硬化,10%-20%肝硬化失代偿,甚至以食管胃底静脉曲张破裂出血引起的呕血黑便为首发症状。本病目前以激素及免疫抑制剂治疗为主,且需要长期或终身服药,长期应用激素和硫唑嘌呤可致肥胖、骨质疏松、骨髓抑制和增加并发肿瘤等危险。为自身免疫性肝炎患者寻找一种更为安全可靠经济副作用小的治疗方法是我们课题的初衷。有报道脐带间充质干细胞有抑制免疫、减轻炎性反、抑制凋亡、促进增生功能,其主要是对T淋巴细胞有免疫抑制作用,对急性肝功能衰竭及终末期肝病有治疗作用。脂肪间充质干细胞同样具有多向分化能力,标本量大,取材简单,痛苦小且细胞培养稳定。基于以上背景,本实验培养脂肪间充质干细胞与淋巴细胞共同培养,分析淋巴细胞抑制情况和多种因子的相关性,为临床治疗自身免疫性肝炎提供理论依据。目的：本研究用ADMSCs和T细胞共培养分析ADMSCs对T细胞的抑制作用,以及在有IFN-γ刺激条件下ADMSCs的IDO表达和NF-κB活化情况以及两者的相关性,以期探索干细胞抑制细胞免疫的机制。如果实验成功,不仅可以探索发现干细胞抑制细胞免疫的机制,还能对AIH开拓一种高效的治疗方法打下基础,对其他类型肝病和自身免疫性疾病产生重要的借鉴作用。方法：大鼠25只,雌性,体重在250g之间,由昆明医科大学动物科提供,常温下饲养,喂固体饲料,饮自来水。大鼠购回后在新环境中饲养30天待脂肪充足后再开始实验。术前禁食12h、禁水6h,称重备皮。取标本前断颈处死无菌条件下开腹,取大鼠肾周及腹股沟脂肪,胶原酶消化后分离细胞放入培养瓶中37℃培养,三天换液,定期观察细胞生长情况,并与传代培养,待第3-5代细胞生长良好时取部分细胞,流式细胞测定细胞特异性脂肪间充质干细胞标记,并加入分化液使细胞定向分化为脂肪细胞与神经细胞,以上确定为脂肪间充质干细胞后冻存细胞待下步应用。抽大鼠血50ml淋巴细胞分离液分离T淋巴细胞,分离培养。选择经INF-γ诱导IDO与NF-κB高表达的脂肪间充质干细胞,培养24h后收集细胞培养液,过滤后,加入到淋巴细胞培养液中刺激培养,分为四组,A组空白对照组淋巴细胞中不加入高表达的脂肪间充质干细胞培养液及SN50;B组刺激组淋巴细胞中加入高表达的脂肪间充质干细胞培养液,不加入SN50；C组阻断对照组淋巴细胞中不加入高表达的脂肪间充质干细胞培养液加入SN50；D组阻断刺激组淋巴细胞中加入高表达的脂肪间充质干细胞培养液及SN50。48h后,后各组收集淋巴细胞及培养上清液,PI染色处理淋巴细胞,上流式细胞仪进行流式检测,分析细胞周期变化情况。细胞培养上清液进行PCR及Western Blot检测IDO与NF-κB分子及蛋白表达水平。结果：脂肪间充质干细胞在培养15天后生长良好,行流式细胞检测特异性指标高表达,并分化为脂肪细胞和神经细胞,将脂肪间充质干细胞和分离的淋巴细胞共同培养后,结果为B组淋巴细胞相对于A、C、D组细胞大多停留在G0/G1期,B组相对于A、C、D组IDO与NF-κB分子及蛋白表达水平高(P≤0.05)。结论：通过脂肪间充质干细胞与淋巴细胞的共同培养测定淋巴细胞细胞周期及IDO与NF-κB分子分子及蛋白表达,可得出通过INF-γ诱导的脂肪间充质干细胞对淋巴细胞有抑制作用,且抑制作用与IDO与NF-κB有相关性,对自身免疫性肝炎的治疗提供了理论基础。