毛白杨雄株花粉败育细胞学观察和双抗虫基因转化的研究

被引量 : 5次 | 上传用户:huiz_CSU
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过基因工程培育抗虫且对环境安全的杨树新品种,已经成为杨树抗虫基因工程研究的主要方面。为避免雌株飞絮,雄株花粉漂移携带外源基因转移等环境问题,本研究确定了以毛白杨败育雄株为双价抗虫基因遗传转化工程体。在对其进行花粉败育形态学和细胞组织学研究基础上,通过农杆菌介导法对其进行双抗虫基因(Bt基因和API基因)的转化,并对筛选获得的卡那霉素抗性植株进行分子生物学检测和抗虫性鉴定。主要研究结果如下: 1) 毛白杨雄株花药外部形态及花粉发育过程连续两年实验数据表明:从花药发育的外部形态观察,在花药发育的过程中没有观察到散粉现象;从花粉发育的细胞组织学观察,其花粉败育的原因可能是绒毡层细胞解体延迟导致小孢子发育受阻,不能形成正常成熟的花粉粒。由此确定该毛白杨雄株为雄性不育。 2) 建立了毛白杨雄株遗传转化再生体系。确定其转化时所用的诱导芽分化培养基为:MS+TDZ0.1mg/L+IAA0.1mg/L附加蔗糖3%、琼脂0.6%;转化芽增殖培养基为:MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.1mg/L附加蔗糖3%、琼脂0.6%;生根培养基为:1/2MS+IBA0.5mg/L附加蔗糖1.5%、琼脂0.6%。 3) 通过农杆菌介导法对258个叶片外植体进行双抗虫基因的转化,其中分化数为81个,共得到108个转化芽。将所得的转化芽经卡那霉素抗性筛选,共得到21株卡那抗性植株,将部分卡那抗性苗经PCR检测,阳性率为90%,3株阳性植株经Southern杂交分析,证明外源Bt基因已整合到杨树基因组DNA中。 4) 用转基因毛白杨雄株的幼嫩叶片喂养杨扇舟蛾和舞毒蛾幼虫,虫试结果表明,转基因毛白杨雄株对幼虫的毒性明显大于对照未转基因植株。根据昆虫的总死亡率将转基因植株划分为高抗、中抗、低抗、不抗四个等级,筛选出4个高抗无性系(D-84、D-87、D-94、D-95)、3个中抗无性系(D-74、D-85、D-88)。对测试昆虫的生长、发育进行测定,结果表明:各转基因无性系对测试昆虫的生长发育有明显抑制作用,转基因无性系中昆虫各发育龄期比对照明显延长,昆虫体重增长速率比对照明显减慢。说明Bt基因和API基因在植物细胞内能够有效地表达,其表达产物具有较强的毒性。从而提高了该转基因毛白杨雄株的抗虫性。
其他文献
<正>在碧绿的原野上,牛羊惬意地嬉戏玩耍,牧民们信马由缰。天高云淡,悠扬的马头琴在耳边回响。这是一幅多么令人神往的场景。课堂学习如果也有这样的自由、优美的意境该有多
目前,随着人们对能源和环境的日益重视,交通工具的轻量化成为必然,镁合金作为最轻的结构材料引起科研人员越来越高的重视。但镁合金在高温环境中下的力学性能偏低,特别是环境温度
<正>"李国庆打电话给我说不要打价格战,我说我们不是在打价格战,如果是打价格战的话我会直接标明‘一折起售’,你敢跟我玩吗?你玩不起的。"苏宁易购总经理李斌在接受《经理人
目的针对生物、化学毒剂的环境污染风险,研究一种泡沫洗消剂,评价其对生物毒剂的消毒效果。方法采用过氧化氢和碳酸氢钠联合作为强亲核试剂,作为泡沫洗消剂主要成分,以枯草杆
运用影片拍摄及解析的方法,对10名中国优秀女子400m跨栏跑运动员栏间跑节奏的时空特征进行分析,并与前苏联400m跨栏跑运动员斯捷潘诺娃的栏间跑节奏进行对比。研究表明:中国
对孕12~16周的意外妊娠,以往多采用利凡诺加钳刮术中止妊娠,手术有一定的风险。我们于1996年9月~11月使用卡孕栓配合钳刮术终止12~16周的妊娠,取得了较好的效果,现报告如下。1资料与方法11受试对象27例
45钢轮胎模具在使用过程中,受到橡胶粘附、腐蚀、高频次摩擦等因素的影响,表面易粘附大量的橡胶,导致其组织、形貌受到不同程度的破坏而失效,需要对模具进行不断的拆卸、清洗
本文概述了碳/陶复合材料研究与开发的历史和现状以及该类材料的技术特性及其应用领域,并简介了混合磨碎法、(热)压烧结法及浸清法等制备碳/陶复合材料的基本原理。
在中学美术教学中,除了模仿和基础造型训练之外,教师要把造型意识渗透到美术学习的各个领域,在绘画、雕塑、设计等各种门类的创作过程中,通过教师得当的引导,提高学生的造型
建设天然气加气站的成本费用非常高,这就需要事先对加气站的设备投资费用和运行费用以及销售盈利进行预算,分析加气站的经济性,从而选择合理的建设加气站的方式以及加气站的