人肝再生增强因子生物活性的研究

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人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration, hALR)是从人胎肝组织中克隆到的一种新型的促肝细胞增殖因子,除促进肝细胞增殖外,还能保护肝脏,预防肝纤维化。本实验的目的是克隆人肝再生增强因子ALR205基因并研究其对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法利用RT-PCR技术从人肝癌细胞HepG2中扩增ALR205基因编码区,构建真核表达载体pCDNA3.1-ALR205。将重组质粒以200μg/kg剂量尾静脉注射给CCL4致急性肝损伤大鼠,检测血清AST、ALT水平,肝组织病理学变化、肝组织增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen PCNA)并对照pCDNA3.1-ALR125基因治疗来观察ALR205基因对急性肝损伤的疗效。结合RT-PCR检测肝组织ALR205 mRNA表达情况。结果克隆出ALR205基因,测序结果与文献报道一致。两种重组质粒用于急性肝损伤大鼠后,血清酶学检查结果表明外周血AST(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)水平显著降低(P<0.01),肝组织病理损害情况大幅度减轻,治疗组肝PCNA指数均明显高于其它组(P<0.01)且ALR205比ALR125在促肝细胞增殖方面有明显差异(P<0.05),只有ALR205基因治疗组检测出阳性条带。结论。ALR205重组质粒体内表达产物通过促进肝细胞增殖,降低血清AST、ALT水平发挥抗急性肝损伤作用。
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