鸭油对D-半乳糖诱导的小鼠氧化应激损伤的改善作用及机理初探

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鸭油中油酸为30.63%、亚油酸为17.2%、α-亚麻酸为0.37%、花生四烯酸为0.9%,不饱和脂肪酸中油酸含量较高,具有较好的利用价值,但目前对鸭油的研究较少。因此,本课题首先通过在体外测定鸭油的氧自由基吸收能力(ORAC值)、FRAP值、对DPPH·的清除率、抑制β-胡萝卜素褪色的能力、对BSA的PCO的影响、对DNA的保护潜力,评价鸭油在体外是否具有抗氧化能力。然后,给小鼠腹腔注射21 d剂量为1000 mg/kg·BW的D-半乳糖建立氧应激模型,再灌胃低剂量鸭油(625 mg/kg·BW)、中剂量鸭油(1250 mg/kg·BW)、高剂量鸭油(2500 mg/kg·BW)、纯鸭油(2500 mg/kg·BW)、还原型谷胱甘肽(200 mg/kg·BW)、配制鸭油的溶剂45 d。灌胃结束后,通过测定小鼠血浆的脂质、蛋白质、DNA氧化产物含量,抗氧化酶活性、抗氧化物质含量、DNA修复酶活性、总抗氧化力(T-AOC),评价鸭油是否能改善小鼠的氧化应激损伤;测定小鼠肝脏的Keap1 m RNA、Nrf2m RNA、SOD m RNA、GPx m RNA、MT m RNA、Trx m RNA、OGG1 m RNA、MTH1m RNA的相对表达量,初步探讨鸭油改善小鼠氧化应激损伤的机理。所得实验结果如下:(1)在体外条件下,35 mg/m L鸭油的ORAC值为(2.59±0.15)μmol TE/g,FRAP值为(241.87±3.05)μmol/L,清除0.093 mmol/L DPPH·的IC50值为(15.03±0.53)mg/m L,对β-胡萝卜素褪色的抑制率为(67.29±3.37)%。1 mg/m L的鸭油对DNA的保护率为(43.27±0.01)%。鸭油质量浓度为6 m L/g蛋白时,会导致BSA的PCO含量增加(50.00±3.21)%,促进了BSA的氧化。(2)与模型组相比,灌胃高剂量鸭油(2500 mg/kg·BW)的雄性、雌性小鼠血浆的脂质氧化产物8-iso-PGF2α含量分下降20.88%、16.33%(p<0.05);蛋白质氧化产物PCO含量分别下降9.91%、12.06%(p<0.05),3-NT含量分别下降11.61%、13.84%(p<0.05),AOPP含量分别下降13.57%、10.93%(p<0.05);DNA氧化产物8-OHd G含量分别下降21.48%、22.87%(p<0.05),5-OHd C含量分别下降15.10%、10.04%(p<0.05);抗氧化酶T-SOD活性分别升高30.93%、45.85%(p<0.05),GPx活性分别升高24.14%、11.29%(p<0.05);抗氧化物质MT含量分别升高17.70%、9.86%(p<0.05),Trx含量分别升高24.13%、21.39%(p<0.05);DNA修复酶OGG1活性分别上升15.10%、12.33%(p<0.05),MTH1活性分别上升18.27%、9.24%(p<0.05);T-AOC分别升高23.08%、27.57%(p<0.05),鸭油改善了小鼠的氧化应激损伤。不同实验组小鼠血浆的PCO、3-NT、AOPP、8-OHd G、5-OHd C含量,GPx活力、Trx含量、T-AOC在雌、雄之间差异不显著(p>0.05)。低剂量组、中剂量组、纯鸭油组小鼠血浆的T-SOD活性在不同性别间的差异显著(p<0.05),高剂量鸭油组小鼠血浆的8-iso-PGF2α含量、MT含量、MTH1活性在不同性别间的差异显著(p<0.05),模型组小鼠血浆的OGG1活性在不同性别间的差异显著(p<0.05)。(3)与模型组比较,灌胃高剂量鸭油(2500 mg/kg·BW)的雄性、雌性小鼠,其肝脏的Keap1 m RNA的相对表达量分别下降23.30%、28.27%(p<0.05),Nrf 2m RNA的相对表达量分别上升112.00%、76.92%(p<0.05)SOD m RNA的相对表达量分别上升68.32%、70.57%,GPx m RNA的相对表达量分别上升141.75%、151.22%(p<0.05),MT m RNA的相对表达量分别上升56.00%、49.90%(p<0.05),Trx m RNA的相对表达量分别上升62.00%、78.89%(p<0.05),OGG1 m RNA的相对表达量分别上升34.42%、28.12%(p<0.05),MTH1 m RNA的相对表达量分别上升40.79%、43.94%(p<0.05)。不同性别各实验组小鼠肝脏的Keap1 m RNA、Nrf2 m RNA、MT m RNA、Trx m RNA、OGG1 m RNA、MTH1 m RNA的相对表达量在雄性与雌性之间差异不显著(p>0.05)。正常组小鼠肝脏的SOD m RNA在雌、雄之间的相对表量差异显著,灌胃鸭油后各剂量鸭油实验小鼠肝脏的SOD m RNA在雌、雄之间的相对表达量差异不显著(p>0.05)。结论:体外实验证明,鸭油具有氧自由基吸收能力、铁还原能力、对DPPH·的清除能力,能抵制脂质、DNA的氧化损伤。动物实验表明,鸭油能改善D-gal诱导的小鼠的氧化应激损伤,其机理可能是通过激活肝脏的Keap1/Nrf2信号通路,促进其下游调控的抗氧化酶、抗氧化物质、DNA修复酶转录水平的提高来实现的。此外,鸭油在改善小鼠的氧化应激损伤时存在一定的性别差异。
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