【摘 要】
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目的研究人肥大细胞对人支气管上皮细胞生长的影响。方法从人外周血分离纯化祖细胞(肥大细胞前体细胞),体外诱导分化发育形成肥大细胞。将肥大细胞(MC)与人支气管上皮细胞株(
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目的研究人肥大细胞对人支气管上皮细胞生长的影响。方法从人外周血分离纯化祖细胞(肥大细胞前体细胞),体外诱导分化发育形成肥大细胞。将肥大细胞(MC)与人支气管上皮细胞株(16HBE细胞株)共培养3天后,分别用免疫细胞化学法和Western blot技术检测16HBE细胞中角蛋白(CK-8)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙粘蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达;用细胞划痕实验检测肥大细胞对16HBE细胞迁移能力的影响;用CCK-8实验检测肥大细胞对16HBE细胞增殖的影响。结果1、May-Grunwald Giemsa染色法和免疫组化鉴定培养的细胞为肥大细胞。2、免疫组化染色实验结果显示:人外周血祖细胞源性肥大细胞能够增强16HBE细胞Vimentin和α-SMA蛋白表达,降低CK-8和E-Cadherin蛋白表达。Western blot实验结果显示:肥大细胞可减低16HBE细胞CK-8、E-Cadherin蛋白表达量,增加Vimentin、α-SMA蛋白表达量。3、细胞划痕实验结果显示:人外周血祖细胞源性肥大细胞能促进16HBE细胞的迁移。CCK-8实验结果显示:肥大细胞能促进16HBE细胞的增殖。结论人外周血祖细胞源性肥大细胞能够增强16HBE细胞Vimentin和α-SMA蛋白表达,降低CK-8和E-Cadherin蛋白表达,并能促进上皮细胞的迁移和增殖。结果提示,肥大细胞可能参与人支气管上皮细胞发生上皮间质转化(EMT)。
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