复方红景天胶囊处方由红景天、玄参两味药材组成,主要用于治疗缺血性脑中风。复方红景天胶囊仅含有两味药材,药物精少,易于控制,具有广阔的开发应用前景。本课题通过对红景天、玄参提取纯化工艺的研究,制备红景天、玄参的有效部位。分别对红景天和玄参中间体进行质量标准研究,确保中间体质量的稳定性和均一性。开展复方红景天胶囊质量标准的研究,确保制剂的质量稳定可控。通过对红景天与玄参组合物最佳药效配比的研究,为开发出疗效显著的天然药物复方制剂奠定基础。一、复方红景天胶囊制备工艺研究以红景天苷的含量为考察指标,对红景天提取纯化工进行研究,最终确定红景天提取纯化工艺为:红景天饮片加8倍量70%乙醇,回流提取3次,每次2小时,滤过,合并滤液,减压浓缩(70℃,-0.08MPa)至每毫升含1.0g生药材(d=1.08,50℃);将浓缩液加入D101大孔树脂柱中,以5倍量柱体积纯化水洗脱,弃去洗脱液,再用5倍量20%乙醇作为洗脱溶剂,收集乙醇洗脱液,减压浓缩(70℃,-0.08MPa)至相对密度约为1.30(50℃),浓缩液减压干燥(60℃,-0.08MPa),粉碎,备用。以哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C的含量为考察指标,对玄参提取纯化工艺进行考察,确定玄参提取纯化工艺为:玄参粗粉加10倍量50%乙醇,回流提取2次,每次3小时,滤过,合并滤液,减压浓缩(70℃,-0.08MPa)至相对密度1.10(50℃),加入乙醇使含醇量达80%,静置48小时,上清液减压浓缩(70℃,-0.08MPa)至每毫升含有0.5g生药材(d=1.05,50℃);将浓缩液加入D101大孔树脂层析柱中,以2倍量柱体积纯化水洗脱,弃去洗脱液,再分别以25%和70%乙醇作为洗脱溶剂,各收集4倍量柱体积洗脱液,合并,减压浓缩(70℃,-0.08MPa)至相对密度约为1.30(50℃),减压干燥(55℃,-0.08MPa),粉碎,备用。组方经药效实验验证后,以休止角、吸湿百分率等为考察指标,对成型工艺进行研究,选择微晶纤维素作为复方红景天胶囊的稀释剂,浸膏粉与微晶纤维素用量的比例为5:1,胶囊内容物性状等符合胶囊充填要求,成品质量均一、稳定性好。二、复方红景天胶囊质量标准研究以性状、鉴别、水分、总灰分、红景天苷、酪醇、大花红天素为考察指标,初步建立红景天中间体的质量标准:规定红景天提取物为黄棕色粉末,无臭,味微苦;水分不得超过4.0%,总灰分不得超过0.9%,建立红景天苷、酪醇、大花红天素含量测定方法。以性状、鉴别、水分、总灰分、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C为指标,初步建立玄参中间体的质量标准:规定玄参提取物为棕褐色粉末,味苦;水分不得超过5.0%,总灰分不得超过0.8%,建立哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C含量测定方法。根据《中国药典》2010年版制剂通则项下胶囊剂的相关要求,对复方红景天胶囊性状、鉴别、水分、装量差异、崩解时限、含量测定进行研究,初步建立复方红景天胶囊质量标准(草案):规定本品为胶囊剂,内容物为红棕色至棕褐色细颗粒,味微苦;水分、装量差异、崩解时限应符合《中国药典》2010年版制剂通则项下胶囊剂的相关要求,本品每粒含红景天苷、哈巴苷、哈巴俄苷含量分别不得少于25.1 mg、21.6 mg、18.5 mg。三、复方红景天胶囊初步稳定性研究按工艺制备三批复方红景天胶囊,按本品质量标准及中药新药稳定性试验相关要求,在温度25℃±2℃,相对湿度60%±10%,以及温度40℃±2℃、相对湿度75%±5%条件下分别进行室温及加速稳定性研究,研究结果表明本品在三个月内各项指标均符合质量标准要求,稳定性较好。四、红景天与玄参中间体组方配比研究本实验首先通过对HX各配比的体外活性筛选确定了最佳比例为HX(1:1)。通过颈内动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,观察HX(1:1)组方对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠的行为学、脑梗死面积和脑含水量的影响,结果发现,HX中、高剂量组可使模型大鼠的脑梗死面积明显缩小,脑梗死率降低,对由脑缺血引起的脑组织水肿有一定的调节作用,且造模72小时后,大鼠的行为障碍明显得到改善,表明红景天与玄参组方对大鼠局灶性脑缺血损伤再灌注具有保护作用。