促孕复方有效组分DS147的质量控制及促进着床作用机制研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinmeng79
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
DS147是从临床经验方促孕复方通过醇提后乙酸乙酯萃取并通过药理实验筛选得到的具有促进胚胎着床作用的中药复方有效组分,该复方由黄芪、黄芩、白术和续断组成。中药质量控制是中药研究热点,也是中药现代化发展的中药敲门砖,指纹图谱是质量控制研究的重要手段。本课题以HPLC指纹图谱分析方法为主,对DS147进行质量控制研究。另外,本课题通过检测小鼠正常组模型组和给药组子宫组织蛋白质表达差异的变化,用蛋白组学激光捕捉显微切割技术-二维电泳-质谱(laser capture microdissection-double dimension Electrophoresis-Mass spectum,LCM-DE-MS)技术路线研究分析DS147作用前后在子宫组织细胞中受调节的蛋白分子,以期筛选得到DS147促进着床,调控着床的关键分子,从而为深入准确阐明其药效作用的分子调控机制和作用靶点。  1.促孕复方有效组分DS147指纹图谱及质量研究  利用HPLC指纹图谱对复方DS147进行质量控制,经过多次探索,确定流动相系统为甲醇-水溶液,梯度洗脱,流速0.8mL/min。紫外检测波长为234nm,运行时间120min。以此建立了复方DS147指纹图谱分析方法,获得了复方DS147指纹图谱,找到13个色谱峰作为共有指纹峰。这些指纹峰特征性强,可以用来作为整体评价复方质量的指标。通过对照品的HPLC色谱图保留时间与指纹图谱的比较,确定2、6、9、10、12、13号峰分别是指标性成分獐牙菜苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、汉黄芩素、白术内酯II,并计算了这6个指标性成分的含量。初步建立了复方DS147质量评价的方法。  2.促孕复方有效组分DS147促着床机制研究  分别利用超排卵模型和吲哚美辛模型造模,自着床后开始灌胃给予DS147,给药5天后颈椎脱臼处死动物,取出子宫组织迅速投入液氮中保存。将液氮冻存的子宫组织粉碎,进行双向凝胶电泳实验,染色,扫描胶条,分析凝胶电泳图,进行蛋白质差异化比较,得到含量改变的蛋白质,选取有显著性变化的蛋白质点做质谱分析。分析表明,正常(CN)组、超排卵模型(CM)组和超排卵模型中药(CZ)组有15种蛋白质表达发生明显改变。和CN组相比,CM组有3种蛋白质明显表达下调,CZ组较之CM组明显表达上调;有12种蛋白质CM组较之CN组明显上调,但是CZ组较之CM组明显下调。正常(IN)组、吲哚美辛模型(IM)组和吲哚美辛中药(IZ)组有23种蛋白质表达发生明显改变,和IN组相比,有7种蛋白质IM组较之IN组明显下调,但是IZ组较之IM组明显上调;有16种蛋白质IM组较之IN组明显上调,但是IZ组较之IM组明显下调。初步确定这些是DS147促着床的靶点蛋白质。
其他文献
白刺花(又名苦刺花)为蝶形花科植物自刺花Sophroa viciifolia Hance的花,具有清热燥湿、凉血解毒、利湿消肿等功效。主要用于湿热痢疾、肝炎、皮肤瘙痒、滴虫性阴道炎,血热之衄
GEN滴丸主要由大豆异黄酮提取物制备而成,用于良性前列腺增生的治疗。该方根据大量的文献资料对处方中药物的现代药理研究,结合临床用药要求及处方中药物成分的性质,采用均匀设
金铁锁Psammisilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu为特产于我国西南的单种属,其疗效明显。但由于成材时间较长,且完全依靠自然生长,野生资源逐渐减少,现已作为稀有濒危物种列于《
当前中药材重金属问题受到了国际国内的广泛关注。在研究过程中发现,中药材种类繁多,不同种类药材因生长环境、生长周期以及对重金属富集特性的不同,其重金属污染情况各异。然而
目的:(1)对蛹虫草进行性状鉴别以及发酵产物提取分离。以期得到结构新颖且活性较好的单体化合物,并对其进行结构鉴定,对某些潜力化合物推测它们的生源途径,以便通过人工培养或人
目的:  研究“诃子解草乌毒”毒代动力学原理。  方法:  (1)UPLC/Q Exactive MS法同时检测家兔血浆中AC、HA、MA含量的建立。流动相为甲醇-水(0.2%甲酸,0.015%三乙胺)=80:20
鼻渊净颗粒是由辛夷、苍耳子、麻黄、白芷、薄荷、黄芩、生地、丹参、茯苓、甘草十味药组成的中药复方制剂,系在宋·严用和撰《济生方》所载“苍耳散”的基础上加减而成。具有
成纤维细胞生长因子9(FGF9)是FGFs家族中的一种分泌型蛋白,由间皮细胞和上皮细胞分泌,具有骨骼发育、组织修复、毛发再生等多种生物学活性。FGF9的研究从癌症、骨骼相关疾病、性腺分化等的透彻机理机制到骨关节炎治疗、促进毛发生长与创伤修复的作用机理,临床应用及需求的逐步加大。植物油体融合技术的广泛应用,且红花作为生物反应器生产药物蛋白已成为研究热点。本实验通过红花表达oleosin-rhFGF9