论文部分内容阅读
目的肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,是当今世界致死率第三高的恶性肿瘤。早期肝癌无特异性临床症状、无明显阳性体征或仅有类似肝硬化体征,当出现明显临床症状和体征时肝癌已处于中晚期,极大地影响了肝癌的治愈率及预后。代谢组学是继转录组学和基因组学之后新近发展起来的一门学科,是系统生物学的一个重要分支,其原理是通过分析生物体内小分子代谢物的生物变化,来研究整体的生物代谢状况。代谢组学技术已经在疾病分型、标志物发现、药物毒性评价等方面展示了很好的应用前景。现在已经有越来越多学者利用代谢组学技术对肿瘤等疾病进行研究并寻找潜在的代谢生物标志物。本研究通过代谢组学的研究方法,采用DBS直接注射质谱技术对41例首次确诊的肝癌、48例肝硬化、40例肝癌未复发、41例肝癌复发患者的血样标本进行代谢组学分析,筛选出用于辅助肝癌及判定预后的差异代谢物,希望为肝癌的诊断及预后判断提供一个新的思路。方法1.研究对象及实验分组:本研究选取我院住院患者170例(其中包括41例首次确诊肝癌、48例肝硬化、经治疗后41例复发肝癌和40例未复发肝癌患者),分为三个实验组。实验组1为41例首次确诊肝癌患者和48例临床确诊肝硬化患者。实验组2为41例治疗后肝癌未复发和40例肝癌复发患者。实验组3为48例肝硬化与41例肝癌复发患者。诊断标准参照2017年国家卫生计生委办公厅发布的原发性肝癌诊疗规范指南,收取上述受试者的全血标本。2.实验方法:基于干血滴(DBS)的直接注射质谱代谢组学方法。检测的目标代谢物包含23个氨基酸和26个酰基肉碱。3.生物标志物的筛选及鉴定:将实验结果进行提取、预处理等分析后通过谱库检索对化合物进行定性、定量分析。随后将所得数据进行偏最小二乘判别分析(PLS-DA)模型分析,通过分析数据后寻找差异性代谢产物,构建二元Logistic回归分析模型,用ROC曲线验证差异性代谢物的判别能力。结果1.通过多因素分析:肝硬化组中10个检测分子(3种氨基酸Ala,Orn,Ser和7个肉碱(C4-OH,C4,C5,C5-OH,C10,C10:1,C14:1)和2个比值C4/C3,Orn/Cit高于肝癌组。而肝癌组中4个检测分子C16:1-OH,C18,C22,C24和2个比值C5DC/C5-OH,Gly/Ala高于肝硬化组。2.通过多因素分析:在肝癌未复发组与肝癌复发组之间发现了6种差异代谢物。基于这6种代谢物进行回归分析,建立诊断模型,用于判定肝癌复发与否。3.通过多因素分析发现肝硬化组患者与经治疗肝癌复发患者之间存在13种差异性代谢物及6种比值异常。结论代谢组学方法可以为肝癌的早期诊断与预后评估提供新的生物标记物,为肝癌的诊断及预后评估提供了新的技术手段。