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浓缩苹果清汁在常温贮存和运输的过程中,耐高渗透压酵母菌的迅速繁殖可导致果汁腐败,并产生气体,使果汁的包装物损坏。因此,通过检测鉴定及时发现生产线的耐高渗透压酵母菌以便采取适当的措施加以控制,对浓缩苹果清汁的生产至关重要。本文对浓缩苹果汁中的耐高渗透压酵母菌进行分离与鉴定,并采用正交试验,以菌落生长状况作为综合评价依据,对耐高渗透压酵母菌检测条件进行了优化研究。主要研究结果如下:(1)耐高渗透压酵母菌主要来源于空气、土壤和浓缩苹果清汁,其次是树叶,而生产用水中没有耐高渗透压酵母菌。从浓缩苹果汁中分离出2株细菌,通过16SrDNA测序分析证实为乳糖酶的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)标记为A-1和季氏毕赤氏酵母(Pichia guilliermondii)标记为A-2。2菌株均是耐高渗透压酵母菌(Osmophilic yeast)的菌株。(2)不同蔗糖含量对耐高渗透压酵母菌的生长影响不同,随蔗糖浓度增大,耐高渗透压酵母菌的菌落数呈下降趋势;随着培养时间的延长,不同蔗糖浓度下,耐高渗透压酵母菌均呈增加趋势。(3)在低温10℃和高温50℃的培养条件下,培养时间在24h~120h耐高渗透压酵母菌均不生长,培养温度在20~40℃,培养时间在24~120h条件下,均可以培养出耐高渗透压酵母菌,且在30℃耐高渗透压酵母菌生长良好。(4)在不同pH条件下,培养时间在48h~120h耐高渗透压酵母菌生长良好,菌落数无差异,且最佳培养时间为48h,pH值为5.4。(5)不同稀释度在培养24h,耐高渗透压酵母菌不能生长,在不同稀释度条件下,培养时间在48h~120h耐高渗透压酵母菌生长良好,菌落数差异不大,且最佳培养时间为48h,稀释比例为1:20。(6)分离培养耐高渗透压酵母菌的优化组合为A1B4C3D3。即pH值为3.6,稀释度为1:40,培养基中蔗糖浓度为60%,培养温度为30℃。